Colloque

Une nouvelle méthode pour évaluer la pureté stéréochimique d'un acide aminé L ou D. Son application à l'étude de la spécificité enzymatique

Charles C. Gerday

Walter G. Verly

Membre a labase

Charles C. Gerday

Résumé du colloque

L'étude de la stéréospécificité enzymatique vis-à-vis de substrats dérivés d'acides aminés a été entreprise depuis de nombreuses années. L'analyse des produits d'hydrolyse se faisait à l'aide de méthodes polarimétriques ou de D-amine-oxydase. Nous venons ajouter, à cet arsenal, une méthode chimique beaucoup plus sensible que les précédentes surtout lorsqu'on utilise des produits radioactifs. Elle consiste à coupler à l'acide aminé libéré un autre acide aminé optiquement actif. Le couple de diastéréoisomères obtenu est alors résolu par chromatographie sur colonne. La surface des pics donne le pourcentage de chacune des formes. Cette méthode a permis de détecter 4% de forme D dans une préparation commerciale de L-phénylalanine tritiée et d'entamer une étude de la stéréospécificité de divers enzymes agissant sur des dérivés de phénylalanine avec notamment comme but la préparation d'une L-phénylalanine marquée absolument dépourvue de contamination par l'énantiomère.