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Résumé du colloque
La culture de cellules épidermiques autologues en feuillets transplantables a radicalement amélioré les chances de survie des très grands brûlés. Ce présent communiqué décrit la première expérience clinique au Canada de greffes épidermiques cultivées in vitro. Les deux patients ont été respectivement âgés de 58 et 48 ans et ont subi des brûlures à 82% et 55% de leur surface corporelle. Dès que possible après admission en un bloc opératoire, un dermatome (2 cm²) fut prélevé au niveau d’un site épargné par les brûlures. Ce morceau, dont le derme fut excisé mécaniquement à l’aide de microciseaux, est alors finement découpé et trypsiné afin de dissocier les cellules épidermiques. Confinement dans des flacons à culture cellulaire (75 cm²) sont préparés et ensemencés à 1,5 à 2 x 10⁶ cellules d’fibroblastiques murines 3T3-J2 (Dr Howard Green, Boston). Ces cellules irradiées par 8000 Rad (Grammacell 220) permettent une croissance accélérée des kératinocytes. Ces flacons tapis sont alors ensemencés avec 2 x 10⁵ kératinocytes suspendus dans un milieu composé de Dulbecco Modified Medium (DME) et de HAM’R-12 dans un rapport de 1:1 avec les additifs suivants: sérum de veau foetal, hydrocortisone, toxine du choléra, transférine humaine, insuline, T₃. Après 14 à 23 jours ces primo cultures deviennent confluentes, elles furent trypsinées afin d’obtenir des sous-cultures. La concentration d’ensemencement est alors de 3 x 10⁴ kératinocytes par cm² en sous culture. Les greffes furent obtenues en libérant enzymatiquement les feuillets épidermiques avec de la Dispase ™ (Boehringer-Ingelheim). Ils furent alors fixés par des ligatures métalliques à des gazes vaselinées. La greffe se fait par simple déposition de ces feuillets sur les lésions des patients. Des documents vidéo et photographiques témoignent de l’évolution favorable de ces greffes.
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