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Utilisation d'anticorps monoclonaux pour le dépistage de l'antigène HBsAg associé au virus de l'hépatite B

A. Boulet
J.P. Lavallière
Michel Bérubé
Lise Bazinet
J.P. Valet
AB

Membre a labase

A. Boulet

Résumé du colloque

Des anticorps monoclonaux dirigés contre l'antigène de surface du virus de l'hépatite B (HBsAg) ont été obtenus par fusion de lymphocytes de souris immunisées avec de l'antigène purifié par chromatographie d'affinité et des cellules de myélome de souris Sp 2/0 maintenues en culture exponentielle. Le dépistage des clones sécréteurs a été effectué par RIA en phase liquide. De l'antigène HBs de sous-type ad et ay a été utilisé pour les immunisations dans le but d'obtenir des anticorps pouvant reconnaître toutes les variantes du virus de l'hépatite B. Pour chaque fusion nous avons obtenu entre 10 et 20% de clones sécréteurs. La sélection a été effectuée d'après le titre de l'anticorps sécrété et la concentration d'immunoglobine de souris dans le surnageant de culture. Les clones intéressants ont été reclonés par dilution limite. Parmi les meilleures souches obtenues, une sécrète un anti-HBs classe IgM et deux sécrètent des anticorps de classe IgG. Ces souches possèdent une avidité et une affinité suffisantes pour être utilisées dans un RIA pratique. Sous les échantillons positifs trouvés à l'aide de réactifs commerciaux l'ont été aussi avec notre trousse. Par contre, nous avons trouvé parmi notre donneur de sang un faux positif qui s'est avéré positif de l'anti-souris. Nous procédons actuellement à l'évaluation de la sensibilité du test, vis-à-vis du sous-type ad et ay.

Contexte

Section :
Biologie cellulaire et moléculaire
news icon Thème du colloque :
Biologie cellulaire et moléculaire
host icon Hôte : Université Laval

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Titre du colloque :

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