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Utilisation de systèmes de synthèse protéique pour l'expression des gènes de l'ADN chloroplastique

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G. Robitaille

Résumé du colloque

Des fragments Bam HI ont été insérés dans le site de résistance à la tétracycline du plasmide pBR322 et introduits dans E. coli. Nous avons utilisé deux méthodes pour caractériser les produits des gènes codés par ces segments d'ADN chloroplastique: un système couplé de transcription-traduction (S-30 de E. coli) et un système utilisant les "minicells" produites par le mutant E. coli P678-54. Dans chacun de ces cas, la comparaison des synthèses a été faite en utilisant des plasmides hybrides dont les fragments sont orientés dans les deux sens par rapport au promoteur de la tétracycline. Certains produits de traduction sont spécifiques et réagissent immunologiquement avec soit les anticorps dirigés contre l'ensemble des protéines membranaires des thylakoïdes, ou avec les anticorps dirigés contre les protéines ribosomiques chloroplastiques. Nous présenterons de plus les résultats de l'analyse des produits de traduction des fragments Bam HI-5 (3.1 kb) et Bam HI-7 (9.1 kb) obtenus par immunoprécipitation et électrophorèse (PAGE-SDS) et par cartographie peptidique.

Contexte

host icon Hôte : Université du Québec à Trois-Rivières

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