Colloque

Utilisation d'hépatocytes de souris pour la détermination de la teneur en ADN de noyaux extraits de tissus foliaires de Mélèze hybride (Larix x eurolepis Henn) par cytométrie en flux

Janet Wyman

Saad Mansour

Michel Fournier

France Guertin

Sylvie Laibrette

Membre a labase

Janet Wyman

Résumé du colloque

L'utilisation de la cytométrie en flux pour l'analyse des taux d'ADN végétal est encore très récente mais en plein essor. Nous présentons une méthode rapide et fiable pour extraire des noyaux intacts à partir de petites quantités (100 mg) de tissus qui permet, entre autres, l'analyse du contenu en ADN de cellules individuelles propagées in vitro. De plus, un nouveau standard est présenté. Le choix d'un standard tridimensionnel est important pour un haut degré de précision de la détermination de la quantité d'ADN; ceci résulte dans le taux d'ADN total situé et similaire à celui-ci déterminé chez la souris. Les standards dans notre étude, soit le thymus de rat et le foie de souris "inbred" Balb/C, remplissent cette exigence. De plus, ces hépatocytes constituent une population représentative de noyaux diploïdes et polyploïdes. L'extraction de noyaux a permis de déterminer la teneur absolue d'ADN de noyaux extraits de tiges et de feuilles de Mélèze hybride cultivé in vitro. Ce taux a été déterminé entre 35 et 32 pg/ADN/noyau à partir de tissus de 2 clones (GG 10/62) de 4 et 8 BC. Ces standards ont été utilisés avec des plantes dont le contenu en ADN varie de 4-6 pg/noyau à 35 pg/ADN/noyau, ce qui représente un choix de standard optimal.

Contexte

Section :

Botanique et écologie végétale

Thème du colloque :

Botanique et écologie végétale

Hôte : Université de Montréal

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Titre du colloque :

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