Communication

Utilisation d’une sonde fluorescente sensible au potentiel membranaire pour mesurer l’activité des toxines insecticides du bacille de Thuringe

Martin Kirouac

Raynald Laprade

Jean-Louis Schwartz

Sébastien Rivest

Vincent Vachon

Membre a labase

Martin Kirouac

Résumé de la communication

Le bacille de Thuringe est un insecticide biologique largement utilisé comme alternative aux insecticides chimiques. Les toxines produites par cette bactérie agissent en formant des pores après s’être liées à des récepteurs spécifiques situés sur la surface luminale des cellules épithéliales de l’intestin moyen des larves de l’insecte. La membrane luminale est caractérisée par un fort potentiel membranaire jouant un rôle important dans l’absorption de nombreux solutés provenant de la lumière intestinale. Nous avons évalué l’utilité d’une sonde fluorescente, le DiS-C3(5), afin d’analyser les effets des toxines sur le potentiel membranaire généré dans des vésicules de membrane à bordure en brosse purifiées à partir de l’intestin moyen du sphinx du tabac (Manduca sexta). Ce potentiel, généré par l’efflux d’ions potassiques, a la même polarité que celui que l’on retrouve dans l’intestin de l’insecte. La fluorescence est sensible non seulement au potentiel membranaire mais aussi à la force ionique et au pH des solutions. Il s’avère donc nécessaire de tenir compte de l’effet de ces facteurs physico-chimiques pour mesurer l’activité des toxines et analyser les propriétés de leurs pores de façon rigoureuse. Nous avons pu démontrer que, contrairement à l'opinion largement répandue, les pores formés par la toxine ne modifient que très peu la sélectivité ionique de la membrane. Par contre, le potentiel généré est fortement augmenté par l'ajout de valinomycine, et, dans ces conditions, celui-ci est grandement diminué par la présence de toxines actives. Ces travaux démontrent clairement que les toxines du bacille de Thuringe n'augmentent pas seulement la perméabilité de la membrane aux ions potassiques. Ils ont également permis la mise au point d'une technique efficace et fiable pour le criblage de nouvelles toxines et l'analyse de leurs effets sur la membrane intestinale des insectes.

Contexte

Section :

Biophysique

Domaine de la communication :

Biophysique

Hôte : Université de Montréal

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