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Résumé du colloque
Lors d'une blessure à l'épithélium cornéen, la plaie se recouvre de fibronectine suite à une augmentation de la synthèse de cette molécule d'adhésion par les cellules épithéliales et des kératocytes stromaux. La fibronectine possède de nombreux sites de liaison reconnus par des récepteurs cellulaires, incluant, entre autres, les intégrines a4B1 et a5B1. Les intégrines sont formées de l'association d'une sous-unité a, responsable de la spécificité du ligand, et d'une sous-unité B. Considérant leur rôle bien connu dans l'adhésion, la migration et la différentiation cellulaire, ces intégrines pourraient être impliquées dans le mécanisme de cicatrisation de l'épithélium cornéen. Des cultures de cellules épithéliales de cornées de lapins (CECL) ont été utilisées afin d'évaluer l'importance de ce processus. Dans le but de mimer le comportement d'un épithélium sain vs celui d'un épithélium en cicatrisation, nous avons respectivement utilisé des cultures de CECL confluentes et sous-confluentes. Dans le but de vérifier s'il existe une variation de l'expression de ces intégrines selon le niveau de densité cellulaire, des techniques d'immunodétection ont été utilisées. Les résultats en immunofluorescence et immunoprécipitation démontrent que l'intégrine a5 est exprimée à la fois dans les cultures non confluentes et confluentes. Par contre, l'intégrine a4 ne semble pas exprimée au cours de ce processus. Ces observations ont également été validées par la mesure de l'activité transcriptionnelle dirigée par les promoteurs des gènes a4 et a5 lorsque transfecté dans des cultures confluentes et non-confluentes de CECL. Ces résultats nous ont permis de démontrer que le promoteur du gène a5 présentait une activité transcriptionnelle jusqu'à 30 fois supérieure à celle du promoteur du gène a4 dans les CECL. De plus, l'activité du promoteur de ces deux gènes (a4 et a5) semble être fortement affectée par le niveau de densité cellulaire, l'atteinte de la quiescence cellulaire se traduisant par une importante réduction (6 à 9 fois) de l'activité de ces deux promoteurs in vitro.
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