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Résumé de la communication
Nous avons identifié et isolé une protéine de 60 kDa de cellules de granulosa bovines que nous avons nommée VASAP-60 (Vacuolar System Associated Protein). Cette protéine se traduit par un ADNc de 2100 pb, dont un cadre de lecture ouvert de 1599 pb codant pour 533 acides aminés (60.1 kDa, pI 4.2). Cette protéine est identique à 87% à une protéine humaine, la 80K-H, et à 81 % à une protéine murine, la sous-unité-b de la glucosidase II. Ces deux protéines sont de fonctions indéterminées. Nous avons démontré que VASAP-60 est exprimée dans l'ensemble des tissus bovins analysés, mais que son patron d’expression est restreint à certains types cellulaires. Les analyses d’immuno-localisations ont révélé que VASAP-60 se localise en région périnucléaire et péricytoplasmique et que sa polarité diffère selon le type cellulaire (luminale versus baso-latérale). Nous avons démontré que VASAP-60 est associée aux structures membranaires, plus précisément, au système vacuolaire, composé par l’appareil endosomal, l’appareil de Golgi et le réticulum endoplasmique. De plus, la structure de VASAP-60 présente les caractéristiques d’un adaptateur moléculaire intervenant dans les interactions protéine-protéine. Nous avons démontré que VASAP-60 interagit au récepteur EGF ainsi qu’à d’autres protéines intracellulaires non-identifiées. VASAP-60 présente donc les caractéristiques d’une protéine de type adaptateur moléculaire qui pourrait être impliquée dans les mécanismes de signalisation et/ou de trafic membranaire intracellulaire. Les fonctions potentielles de VASAP-60 pointent vers des mécanismes cellulaires fondamentaux associées à la modulation de la signalisation de récepteurs par endocytose du complexe ligand-récepteur ou au trafic vésiculaire intracellulaire.
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