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Colloque
La protéine acide fibrillaire de la glie (GFAP) fait partie de la catégorie des filaments intermédiaires. Cette protéine est habituellement localisée au niveau des astrocytes. Toutefois, lors de blessures ou de maladies de l'œil, elle est exprimée en grande quantité dans les cellules de Müller de la rétine. L'objectif de notre travail est d'étudier la régulation du gène de la GFAP dans des conditions normales et pathologiques de la rétine. Nous avons mis au point une méthode de culture des cellules de Müller chez l'humain et le rat. Le phénotype cellulaire a été confirmé par l'utilisation d'anticorps spécifiques à ce …
Colloque
Les intégrines forment une famille de récepteur de la matrice extracellulaire (MEC) et ont un rôle majeur à jouer dans les processus de cicatrication et de migration ainsi que dans le potentiel métastatique de certaines cellules cancéreuses. Plusieurs études d'immunocytochimies et d'immunohistochimies ont démontré que le patron d'expression des intégrines a4b1 et a5b1, deux récepteurs de la fibronectine, était modulé par certains facteurs de croissance et agents mitotiques. Nous avons vérifié l'influence de l'EGF, du bFGF, de l'insuline, du PMA et de l'IBMX sur l'activité transcriptionnelle des gènes des sous-unités a4 et a5 de ces intégrines par transfection transitoire à …
Colloque
Lors d'une blessure à l'épithélium cornéen, la plaie se recouvre de fibronectine suite à une augmentation de la synthèse de cette molécule d'adhésion par les cellules épithéliales et des kératocytes stromaux. La fibronectine possède de nombreux sites de liaison reconnus par des récepteurs cellulaires, incluant, entre autres, les intégrines a4B1 et a5B1. Les intégrines sont formées de l'association d'une sous-unité a, responsable de la spécificité du ligand, et d'une sous-unité B. Considérant leur rôle bien connu dans l'adhésion, la migration et la différentiation cellulaire, ces intégrines pourraient être impliquées dans le mécanisme de cicatrisation de l'épithélium cornéen. Des cultures de …
Colloque
La 3ß-Hydroxystéroïde déshydrogénase/ Δ5-4 isomérase (3ß-HSD) catalyse l'oxydation et l'isomérisation des Δ5-3ß-hydroxystéroïdes en Δ4-cétostéroïdes de même que l'interconversion des 3ß-hydroxy- et 3-céto-5α-androstane stéroïdes. Précédemment, nous avons isolé et caractérisé le type I, qui est le type exprimé de façon spécifique dans le placenta et la peau, de même que celui du type II qui est spécifiquement exprimé dans les surrénales et les gonades. Dans le but d'avoir un meilleur complément de l'expression tissu-spécifique de ces gènes, nous avons fait une étude in vitro de la régulation de ces gènes de type I par expression transitoire de différents régions du promoteur …
Colloque
Le gène p12 chez la souris détermine la production d'un inhibiteur de protéase dont l'expression androgéno-dépendante s'avère restreinte à la prostate, aux vésicules séminales et aux glandes coagulantes. Une étude moléculaire récente nous a permis d'identifier plus de 15 protéines nucléaires trans-agissant interagissant avec la région promotrice 5'-régulatrice de ce gène. Nous avons démontré que l'une de celles-ci interagit avec une séquence cis-active (p12.1) localisée à l'intérieur de la région promotrice (position -456 à -261) entre les boîtes TATA et CCAAT. Une analyse détaillée de la région protéique par délétion, que nous avons réalisée, a permis d'identifier 5 protéines nucléaires …
Colloque
Le produit du gène p12 est un inhibiteur de protéase synthétisé de façon androgéno-dépendante dans la prostate, les vésicules séminales et les glandes coagulantes. Afin d'établir les mécanismes moléculaires responsables de la spécificité d'expression tissulaire du gène p12, nous avons produit plusieurs lignées de souris transgéniques portant les gènes rapporteurs CAT (chloramphénicol acétyltransférase) et tk (thymidine kinase) placés sous le contrôle de trois différentes versions du promoteur humain p12: 1) p12/108 (position -108 à +34) 2) p12/108s qui renferme p12/108 en amont duquel nous avons fusionné une région de p12 potentiellement reconnue par les récepteurs stéroïdiens 3) p12/108M qui renferme …
Colloque
La poly(ADP-ribose) polymérase (PARP) est une enzyme de 113 kDa qui catalyse la synthèse d'homopolymères d'unités ADP-ribose sur diverses protéines nucléaires. Le gène de la PARP chez l'humain et le xénope est situé sur le chromosome 1 et comprend 23 exons. Un fragment d'ADN contenant les 4 premiers exons du gène chez le rat et 5 kb de la région promotrice a été séquencé, et son cDNA isolé. L'analyse de la région promotrice révèle une région de 16 bp (US-1) hautement conservée dans plusieurs gènes "housekeeping", y compris le PARP chez l'humain et l'ADN polymérase β chez l'humain, le rat …
Colloque
L'inductibilité de la ß-lactamase d'E. cloacae 11946 semble être contrôlée par un répresseur. Afin d'élucider le mode régulatoire de cette enzyme, nous avons cloné les gènes codant pour l'enzyme ß-lactamase de cette souche dans pACYC184. Le gène structural de l'enzyme a été isolé sur le plasmide recombinant construit (pGCl091) par délétion Bal31 et séquencé par la technique de Maxam et Gilbert. En amont du gène structural de la ß-lactamase, nous avons identifié une protéine immature de 380 acides aminés comprenant un signal peptidique (19-22 résidus), et retrouvons un segment de 23 à -17 en région de promoteur, incluant les régions …
Colloque
L'inductibilité de la ß-lactamase d'E. cloacae 11946 semble être contrôlée par un répresseur. Afin d'élucider le mode régulatoire de cette enzyme, nous avons cloné les gènes codant pour l'enzyme ß-lactamase de cette souche dans pACYC184. Le gène structural de l'enzyme a été isolé sur le plasmide recombinant construit (pGCl091) par délétion Bal31 et séquencé par la technique de Maxam et Gilbert. En amont du gène structural de la ß-lactamase, nous avons identifié une protéine immature de 380 acides aminés comprenant un signal peptidique (19-22 résidus), et retrouvons un segment de 23 à -17 en région de promoteur, incluant les régions …
