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Colloque
Chez les mammifères, la réplication de l'ADN mitochondrial (ADNmt) est unidirectionnelle et asymétrique. Elle débute au site Oh, situé dans un segment appelé boucle D, qui comprend également les promoteurs HSP et LSP responsables de la transcription des brin lourd (H) et léger (L), respectivement. La boucle D résulte du déplacement du brin H par des chaînes H naissantes (ADN-DH). Le promoteur HSP génère l'amorce d'ARN initiateur de l'ADN-DH au site Oh. La synthèse unidirectionnelle du brin H entraîne l'expansion de la boucle D. Lorsque les 2/3 du brin H ont été répliqués, la synthèse du brin L débute au …
Colloque
La contribution du génome mitochondrial (ADNmt) au phénotype cellulaire est très mal connue. Chez le poulet, nous avons montré que l’élimination de l’ADNmt de lignées de cellules continues modifie positivement ou négativement l’expression de certains gènes, dont celle de la ß-actine et du v-Myc. La question se pose à savoir si les effets observés découlent de l’une et/ou de l’autre des possibilités suivantes: adaptation des cellules aux changements métaboliques résultant de l’inhibition de la chaîne respiratoire ou absence du produit d’un gène mitochondrial fonctionnant à l’extérieur de l’organite comme un élément régulateur. Nous rapportons ici les observations faites suite à …
Colloque
La transcription du génome mitochondrial (ADNmt) des vertébrés s'effectue de façon symétrique à partir de la boucle D, seule région non codante de la molécule. Chez les mammifères, les brins lourds (H) et légers (L) sont transcrits à partir de deux promoteurs à capacité bidirectionnelle, le HSP et le LSP, alors que chez les amphibiens (X. laevis) ces deux mêmes promoteurs sont bidirectionnels. La situation chez les oiseaux semble être différente puisque nous avons montré chez le poulet que l'ADNmt est transcrit à partir d'un seul promoteur, à capacité bidirectionnelle, le HSP/LSP. Dans le but de déterminer si la transcription …
Colloque
Chez le poulet, le génome mitochondrial est pourvu d'une petite région à triple hélice appelée boucle D. Elle renferme l'origine de réplication de la chaîne lourde. Cette structure résulte du déplacement du brin lourd (H) parental par des chaînes lourdes naissantes (ADN-DH) complémentaires au brin léger (L). Nous avons cartographié précisément l'ADN sur le génome mitochondrial du poulet. La molécule a d'abord été marquée aux extrémités 5' et 3' à l'aide de la polynucléotide kinase et de la terminale transférase, respectivement. Après électrophorèse en gel de polyacrylamide, le matériel marqué a été élué et hybridé à la chaîne L. Des …
Colloque
La mitochondrie est un organite semi-autonome à fonctions multiples. Quoique sa biogenèse requiert une participation importante du noyau, l'influence qu'exerce la mitochondrie sur ce dernier est très mal connue. Nous avons abordé l'étude de ce problème en procédant au développement de lignées primaires et continues de cellules aviaires dépourvues de DNA mitochondrial (mit). Les cellules mit et parentales ont été utilisées pour construire des banques de cDNAs. Après hybridation différentielle, des cDNAs très abondants dans la banque des cellules mit ont été isolés, séquencés et identifiés. L'élimination du génome mitochondrial de cellules aviaires (poulet, caille) de types épithélioïde et fibroblastique …
Colloque
Des segments d'ADN mitochondrial de caille et de canard contenant la région contrôle (boucle D), et les gènes codant pour l'ATPase 6, l'ATPase 8 et le COII ont été clonés et séquencés. La comparaison de ces séquences à celles du poulet, montre que les substitutions de base dans les régions codantes ont surtout lieu à la 3ième position des codons et rarement à la 2ième. La plupart de ces substitutions sont silencieuses. Chez la caille, les transitions constituent la plupart des substitutions, alors que chez le canard ce sont les transversions, ce qui est l'atteinte la plus fréquente. Les changements …
Colloque
Parmi les protéines de la phase aiguë de l'inflammation, le l-kininogène est à la fois un donneur potentiel de kinine et un inhibiteur des thiolprotéases. Pour mieux comprendre la nature des facteurs susceptibles de moduler sa synthèse et donc de réguler son action au niveau du foyer inflammatoire, nous avons sélectionné une souche de cellules Vero sécrétant un hétéroatome de rat (4HE1TC3) sécrétant le l-kininogène et l'albumine. À l'aide de méthodes ELISA originales, nous avons défini les taux de synthèse de base de ces 2 protéines en les dosant dans le surnageant de culture (500ng/10^6 cellules/24hrs et 2ug/10^6 cellules/24hrs respectivement). …
Colloque
La transcription du génome mitochondrial des vertébrés s'effectue de façon symétrique: chacune des deux chaînes de DNA est transcrite à partir de la boucle D, seule région non codante. Chez les vertébrés supérieurs, les promoteurs sont unidirectionnels, alors que chez les vertébrés inférieurs (X. Laevis), ils semblent être bidirectionnels. Voulant vérifier ce qui en était chez les oiseaux, qui suivent les amphibiens dans l'arbre phylogénétique, nous avons extrait le RNA mitochondrial (mtRNA) à partir de foie et "cappé" celui-ci in vitro à l'aide de la guanylyltransférase. Par le séquençage des transcrits primaires ainsi "cappés", nous avons localisé un site d'initiation …
Colloque
Nous avons étudié la localisation intramitochondriale de la nucléase 5' dans le foie de rat. A l'aide de digitonine et utilisant la technique de Schnaitman et Greenawalt (J. Cell Biol., 32, 719, 1968) nous avons isolé les membranes mitochondriales internes et externes ainsi que la matrice. Nos résultats démontrent que la nucléase se distribue dans la membrane externe et la matrice, suggérant une localisation bimodale. En milieu isotonique, des mesures de dégradation et de pénétration de l'acide polyadénylique dans les mitochondries suggèrent aussi une distribution bimodale.
Colloque
Les potentialités lipogénétiques de la glande mammaire de lapine en lactation ont été réexaminées à la lumière des données actuellement connues sur le problème de la biosynthèse des acides gras dans l'organisme. Les résultats obtenus, en plus de confirmer de façon non-équivoque le comportement bien particulier de la glande mammaire en ce qui concerne la synthèse des acides gras, sembleraient indiquer la présence dans ce tissu de plus d'un système lipogénétique.
