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Étude des propriétés de l'endoprotéase NS du virus de la nécrose pancréatique infectieuse (VNPI)
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Le VNPI possède un génome composé d'un double brin d'ARN bisegmenté: le segment A code pour une polyprotéine possédant l'arrangement NH2-VP2-VP3-VP3-COOH. Cette polyprotéine est clivée présumément par l'endoprotéase NS (Manning et al.) en deux protéines structurales majeures, VP2 et VP3. Afin de vérifier si la protéine NS est bien une protéinase et qu'elle est responsable du clivage de la polyprotéine, nous avons cloné la bande codant la région NS-VP3 du génome par la technique de RT-PCR et nous avons cloné ce cDNA dans le vecteur d'expression pET21b. Par la suite nous avons analysé le réticulocyte de lapins immunisés avec la …

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Conditions d'expression du gène de l'intégrase de HIV-1 dans des cellules bactériennes
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La SIDA est une maladie fatale causée par le virus HIV-1. Tôt après sa pénétration dans des cellules cibles, l'ARN viral est copié en ADN qui est par la suite intégré dans le génome cellulaire. L'enzyme responsable de cette intégration est appelée intégrase (IN). Étant donné son rôle essentiel au cours de la réplication virale et l'isolement de mutants incapables d'intégrer un génome dans l'ADN cellulaire et inaptes à produire de nouveaux virus infectieux, cette enzyme occupe une place privilégiée pour le développement de nouveaux agents thérapeutiques. La mise au point de ces inhibiteurs nécessite de grandes quantités d'enzymes, et …

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Caractérisation et comparaison antigénique du virus de la nécrose pancréatique infectieuse (VNPI) à l'aide d'anticorps monoclonaux (AMC)
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Le VNPI est responsable d'une maladie aiguë chez les alevins de salmonidés en pisciculture pouvant avoir des pertes économiques importantes. Nous avons produit des AMC contre les sérotypes A1 et A2, ceci afin de déterminer le(s) épitope(s) impliqué(s) dans la neutralisation, d'analyser les relations antigéniques entre les souches et d'établir un test de diagnostic. Les AMC ont d'abord été sélectionnés par ELISA, puis testés pour leur propriété neutralisante. Par radioimmunoprécipitation, les AMC neutralisants ont permis de localiser un épitope conformationnel sur la protéine interne VP2 du virus. Par immunofluorescence, d'autres AMC non neutralisants réagissent avec la protéine interne VP3. Ces …

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Identification des protéines de structure du virus du Bluegill (BGV)
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En combinant les avantages respectifs de l'ultrafiltration sur membrane Amicon, de la précipitation différentielle au PEG-6000 et de l'ultracentrifugation isopycnique sur gradient de métrizamide, nous avons obtenu des préparations hautement purifiées du virus du Bluegill (BGV). L'électrophorèse des virions sur gel de polyacrylamide en conditions dénaturantes a montré un profil polypeptidique contenant 11 bandes avec des poids moléculaires s'échelonnant de 28,700 à 84,000 daltons. La somme de ces poids moléculaires excédant de 1,7 fois les capacités codantes du génome du BGV, nous avons recherché, par diverses méthodes, si ces bandes ne correspondraient pas à des protéines cellulaires soit contaminantes, soit …

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Établissement d'une lignée de cellules d'anguille Anguilla rostrata
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Nous avons effectué des cultures primaires à partir de civelles d'anguilles du fleuve St-Laurent. Après une première phase de croissance rapide, les cellules se sont maintenues en phase stationnaire pendant près de deux ans. Pendant cette période, nous avons changé le milieu de croissance régulièrement et nous avons typiquement les cellules pour stimuler leur division. Suite à cette période, les cellules se sont énoncé à se diviser périodiquement à partir d'un foyer et se sont multipliées indéfiniment depuis. Une étude de leur croissance à différentes températures a montré que ces cellules croissaient entre 20 et 30°C avec une température optimale …

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Établissement d'une lignée de cellules d'anguille Anguilla rostrata
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Nous avons effectué des cultures primaires à partir de civelles d'anguilles du fleuve St-Laurent. Après une première phase de croissance rapide, les cellules se sont maintenues en phase stationnaire pendant près de deux ans. Pendant cette période, nous avons changé le milieu de croissance régulièrement et nous avons typiquement les cellules pour stimuler leur division. Suite à cette période, les cellules se sont énoncé à se diviser périodiquement à partir d'un foyer et se sont multipliées indéfiniment depuis. Une étude de leur croissance à différentes températures a montré que ces cellules croissaient entre 20 et 30°C avec une température optimale …

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Établissement d'une lignée de cellules d'anguille Anguilla rostrata
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Nous avons effectué des cultures primaires à partir de civelles d'anguilles du fleuve St-Laurent. Après une première phase de croissance rapide, les cellules se sont maintenues en phase stationnaire pendant près de deux ans. Pendant cette période, nous avons changé le milieu de croissance régulièrement et nous avons typiquement les cellules pour stimuler leur division. Suite à cette période, les cellules se sont énoncé à se diviser périodiquement à partir d'un foyer et se sont multipliées indéfiniment depuis. Une étude de leur croissance à différentes températures a montré que ces cellules croissaient entre 20 et 30°C avec une température optimale …

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Détection du virus de la nécrose pancréatique infectieuse sur des tissus d'alevins, aide de la technique d'immunoperoxydase indirecte
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Le virus de la nécrose pancréatique infectieuse (NPI) est un agent pathogène important chez les jeunes salmonidés en pisciculture. Alors que l'isolement viral à partir d'homogénats d'alevins morbides est relativement aisé, l'observation du virus en coupes ultraminces est, autrement, assez ardue. Afin de poser un diagnostic rapide et spécifique, nous avons utilisé la méthode d'immunoperoxydase indirecte (IPI). À partir d'un antiserum produit contre la souche ARC 706 de virus NPI, nous avons recherché la présence de l'antigène viral sur des coupes d'alevins entiers, enrobés dans la paraffine. Ceux-ci avaient été prélevés et fixés à des temps différents sur une période …

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Mise en évidence du virus de la maladie lymphokystique des poissons chez un ange français en captivité
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La maladie lymphokystique des poissons affecte une grande variété d'espèces d'eau douce et d'eau salée. Elle est causée par un virus de la famille des iridoviridés. Récemment, nous avons observé la présence de lésions caractéristiques de cette maladie chez un ange français (Pomacanthus Paru) en captivité dans un aquarium municipal. Quelques mois après son arrivée, nous avons remarqué l'apparition d'excroissances blanchâtres sur les nageoires et sur le flanc gauche du poisson. Des biopsies furent effectuées sous examen en microscopie électronique et histochimique. Les résultats des examens histologiques ont permis de la présence de cellules géantes avec corps d'inclusion éosinophiles intracytoplasmiques. …

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Etude au microscope électronique de la capsule hyaline entourant la cellule infectée par le virus de la maladie lymphokystique des poissons
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Le virus de la maladie lymphokystique des poissons ou LDV (Lymphocystis Disease Virus) appartient à la famille des iridoviridés à l'intérieur de laquelle il forme un groupe particulier. Une de ses caractéristiques majeures consiste en la formation d'une capsule hyaline entourant la cellule infectée. Nous avons étudié la formation de cette capsule et sa relation possible avec la morphogenèse du LDV. Le LDV souche Leetown (CTC VR-342) a été cultivé sur cellules BF-2 à 23°C. Après 28 jours d'infection, les cellules ont été fixées et enrobées pour étude sur coupes ultra-minces en microscopie électronique. Nos résultats montrent que la capsule …

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