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Multiplication d'un réovirus de mammifères dans deux lignées de cellules de souris
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Nous avons observé que deux lignées de fibroblastes de souris diffèrent dans leur sensibilité à l'infection par le réovirus de mammifères. Le cycle de multiplication viral est sensiblement plus long dans les cellules SC1 que dans les cellules L. Les cellules SC1 sont aussi beaucoup plus résistantes à la lyse cellulaire, un pourcentage significatif des cellules SC1 pouvant survivre et demeurer infectées de manière persistente. L'établissement de la persistance s'accompagne d'une augmentation du niveau d'expression de la protéine kinase cellulaire PKR souvent impliquée dans le contrôle de la synthèse protéique suite aux infections virales. Nous avons donc continué notre étude …

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Multiplication d'un réovirus de mammifères dans deux lignées de cellules de souris
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Nous avons observé que deux lignées de fibroblastes de souris diffèrent dans leur sensibilité à l'infection par le réovirus de mammifères. Le cycle de multiplication viral est sensiblement plus long dans les cellules SC1 que dans les cellules L. Les cellules SC1 sont aussi beaucoup plus résistantes à la lyse cellulaire, un pourcentage significatif des cellules SC1 pouvant survivre et demeurer infectées de manière persistente. L'établissement de la persistance s'accompagne d'une augmentation du niveau d'expression de la protéine kinase cellulaire PKR souvent impliquée dans le contrôle de la synthèse protéique suite aux infections virales. Nous avons donc continué notre étude …

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Dissection moléculaire de la protéine sigma3 de réovirus
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La protéine sigma3 de réovirus joue plusieurs rôles dans le cycle de multiplication du virus. Nous avons tenté d'identifier certains acides aminés impliqués dans les différentes propriétés de sigma3 en procédant à une "dissection moléculaire" de celle-ci. Le gène cloné, mutagénié par sigma3, a donc été soumis à la mutagénèse dirigée et sous-cloné dans un vecteur plasmidique permettant l'expression transitoire suite à l'introduction dans les cellules COS. Les protéines exprimées ont ensuite été détectées par immunoprécipitation et immunobuvardage. Ces expériences ont permis de démontrer que la région N-terminale de sigma3 était impliquée dans l'assemblage du virus et dans l'activité de …

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Multiplication des réovirus et effet sur la synthèse protéique dans différentes lignes cellulaires
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L'infection de cellules L par le réovirus sérotype 3 entraîne l'inhibition graduelle de la synthèse des protéines cellulaires. La diversité des sérotypes de réovirus et le large éventail de cellules de mammifères pouvant être infectées par ce virus soulèvent des doutes sur la généralité du phénomène et son rôle dans l'infection virale. Nous avons comparé la synthèse protéique, la production virale et la mort cellulaire suite à l'infection. La synthèse protéique a été mesurée par marquage métabolique suivi d'extraction, électrophorèse et détection par autoradiographie. La production virale a été déterminée par titrage sur des cellules infectées. Nos résultats indiquent que …

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