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Rôle de l’activité glycosidase de la protéine sigma1 de réovirus dans la réplication virale
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La protéine sigma1 du réovirus de mammifère agit comme protéine d’attachement. Il a été démontré par des études in vitro que cette protéine possède aussi une activité glycosidase et mucinase. Une hypothèse suggère que cette activité puisse permettre au virus de franchir l’importante couche de mucine couvrant les cellules de l’épithélium intestinal où l’infection primaire a principalement lieu. C’est la forme ISVP (infectious subviral particle) du réovirus qui possède la propriété de dégrader la mucine, car la protéine sigma1 se retrouve à ce moment sous une forme relâchée lui permettant d’exercer son activité. Les ISVPs sont normalement générées à partir …

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Complexité des signaux contrôlant un frameshift programmé -1 essentiel à la prolifération du VIH
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La synthèse de la protéine Gag-Pol, le précurseur des activités enzymatiques du virus VIH, requiert un déphasage (frameshift) programmé de type –1 du cadre de lecture lors de la traduction de l’ARN messager viral par les ribosomes des cellules infectées. Ce frameshift se produit au niveau d’une séquence glissante (U UUU UUA) suivie en 3’ d’une séquence stimulatrice en tige-boucle. Nous avons voulu déterminer si la région suivant la tige-boucle pouvait également influencer le frameshift. Nous avons introduit la région de frameshift du VIH incluant la séquence glissante, la tige-boucle et la portion adjacente à cette tige-boucle, au début de …

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Étude de l'organisation de la protéine sigma3 dans la capside du réovirus de mammifères
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La protéine sigma3, en association avec la protéine mu1C, est le principal constituant de la capside externe de réovirus (virus non-enveloppé, ARN bicaténaire segmenté). Plusieurs rôles distincts dans le cycle de réovirus sont attribués à sigma3 : encapsidation du génome, inhibition de PKR et contrôle de la traduction. Grossièrement, la protéine sigma3 est constituée de deux domaines : l’un en N-terminal possédant une structure en doigt de zinc, l’autre en C-terminal incluant deux motifs d’acides aminés basiques responsables de la liaison à l’ARN bicaténaire. La structure en doigt de zinc est nécessaire à la stabilité de la protéine ainsi qu’à …

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Étude de l'effet des protéines accessoires du VIH-1 dans un système de polarisation
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Il a été déterminé que le virus de l'immunodéficience humaine (VIH-1) présente une forte propension pour un bourgeonnement basolatéral au sein des cellules épithéliales et également une restriction du bourgeonnement à un seul pôle des lymphocytes infectés. Nos travaux ont précédemment démontré que le domaine intracytoplasmique de la glycoprotéine d'enveloppe porte le signal responsable de ce ciblage. Le VIH diffère des rétrovirus dits "classiques" entre autres par la présence de protéines "accessoires". Notre étude consiste à déterminer si le site du bourgeonnement viral peut être déterminant dans l'effet de ces protéines. Les protéines accessoires examinées sont impliquées dans l'augmentation de …

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Implication de la p15E dans la polarisation d'un rétrovirus murin : effets sur la pathogénèse et la transmission chez la souris
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La relâche polarisée virale est prédominante chez les rétrovirus, tel que le VIH, HTLV et MuLV, qui bourgeonnement principalement du côté basolatéral de cellules épithéliales polarisées. Afin de vérifier l’importance de la relâche polarisée dans un contexte in vivo, le virus Cas-Br-E, qui est un rétrovirus murin transmissible sexuellement pouvant causer une leucémie et une paralysie chez la souris sera utilisé dans ces études. Tout d’abord, des mutations ont été introduites dans le signal YXXL intracytoplasmique de la protéine d’enveloppe en substituant la tyrosine (Y) par une sérine (S), en délétant cette tyrosine ou en introduisant un codon stop prématuré. …

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Maturation polarisée du virus d'immunodéficience humaine dans les lymphocytes
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La différentiation des membranes cellulaires, résultant en la création de membranes apicales et basolatérales, est une caractéristique essentielle des cellules épithéliales définies comme étant polarisées. Nos travaux et ceux de plusieurs autres équipes ont démontré que la glycoprotéine d'enveloppe du virus d'immunodéficience humaine est déterminante pour le bourgeonnement préférentiel du virus au niveau des membranes du pôle basolatéral. Une forme de polarisation membranaire a de plus été observée à la surface des lymphocytes, puisque le bourgeonnement semble se faire majoritairement à un pôle de ces cellules. Ce phénomène pourrait faciliter la transmission intercellulaire, à partir des lymphocytes présents dans le …

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Identification des signaux responsables du bourgeonnement polarisé des rétrovirus dans les cellules épithéliales
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Les glycoprotéines d’enveloppe des rétrovirus leur confèrent la propriété de bourgeonner et d’être relâchés de manière spécifique à la membrane basolatérale des cellules épithéliales. Ce phénomène pourrait être pertinent lors de la transmission uro-génitale ainsi que dans la pathogénèse du virus de l’immunodéficience humaine (VIH-1), en favorisant l’accès du virus aux cellules sous-jacentes des muqueuses. Nous avons entrepris de localiser le signal responsable du ciblage basolatéral du VIH-1. Les cellules MDCK, lignée épithéliale bien caractérisée, sont cultivées sur une membrane semi-perméable et cotransfectées avec un plasmide proviral codant pour toutes les protéines du VIH-1 à l’exception de la protéine d’enveloppe …

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Expression de la protéine sigma 3 de réovirus à partir du gène cloné
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La protéine sigma3 codée par le gène S4 de réovirus est une métalloprotéine à zinc ayant de l'affinité pour l'ARN bicaténaire et constituant la protéine majeure de la capside externe. Plusieurs rôles ont été attribués à cette protéine au cours du cycle de multiplication viral. Notamment, elle serait responsable de la régulation de la synthèse protéique en séquestrant l'ARN bicaténaire activateur de la protéine kinase cellulaire ARN dépendante. Des travaux récents, effectués dans notre laboratoire, suggèrent aussi la présence de sigma3 dans le noyau des cellules infectées. Afin de continuer ces études, nous avons récemment établi une lignée de cellules …

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L'Atlas du Québec : la "métrique" d'un territoire
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La réalisation d'un atlas national repose avant tout sur la "mesure" qu'un peuple veut donner à son territoire. De la manière et de la façon dont il osera représenter son espace, découlera sa projection de ce qu'il est et de ce qu'il veut devenir. Nous présenterons une rétrospective de différents atlas nationaux et provinciaux en mettant l'emphase sur l'analyse des contenus. On recense actuellement au Canada une quinzaine d'atlas qui concernent principalement les provinces. Réalisés entre 1956 et 1984, ils traitent de thématiques variées, colligées selon des options de valorisation de leur territoire. La dynamique actuelle des territoires nous oblige …

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Ciblage des glycoprotéines du virus VIH-1 dans des cellules épithéliales polarisées
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Les cellules épithéliales polarisées, dont les cellules MDCK sont un bon modèle en culture, possèdent deux régions membranaires fonctionnellement distinctes. Le domaine apical fait face à la lumière intestinale ou des tubules rénaux alors que la surface basolatérale se retrouve du côté du flux sanguin. Les glycoprotéines de l'enveloppe du virus de l'immunodéficience humaine (VIH-1) confèrent à ce virus la propriété de bourgeonner et d'être relâché spécifiquement par la membrane basolatérale; ce phénomène étant potentiellement très important dans la pathogénèse virale. Nous avons donc entrepris une étude visant en premier lieu à localiser les régions du virus de l'enveloppe responsables …

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