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Les déshydrogénases à courtes chaînes, notamment la 17B-hydroxystéroïde déshydrogénase (17B-HSD), jouent un rôle important dans la biosynthèse des hormones stéroïdiennes en catalysant la formation et la dégradation d'importants stéroïdes sexuels actifs qui stimulent la prolifération des tumeurs mammaires. L'amélioration des connaissances de la relation structure/fonction de la 17B-HSD permettra de faciliter le design d'inhibiteurs efficaces et de créer un enzyme. Présentement, nous effectuons cette étude à l'aide de la mutagénèse dirigée utilisant la réaction en chaîne de la polymérase (PCR). La détermination des sites potentiels à muter est possible grâce aux informations structurales qui proviennent de la résolution des cristaux …
Les dix dernières années ont été témoin d'une évolution rapide des connaissances dans le domaine du génie génétique chez les plantes. Plusieurs difficultés ont été surmontées, notamment, celles liées à la caractérisation et l'isolement des gènes, leur intégration dans le noyau de la cellule et la régénération de plantes à partir de cellules transformées. Ainsi, plusieurs gènes d'intérêt chez plusieurs espèces végétales. Cependant, le niveau d'expression de ces gènes restait souvent faible. Donc, le nouveau défi consiste à optimiser cette expression dans la plante transgénique. Les promoteurs associés à l'expression des gènes étrangers qui sont très forts et constitutifs, ces …
Un abaissement de la température ambiante stimule, chez la luzerne, l'expression de plusieurs gènes, principalement au niveau des racines et du collet. En comparant l'abondance des produits de transcription de ces gènes dans les tissus de plusieurs variétés de luzerne, il est apparu que leur expression était plus intense chez les variétés résistantes au froid que chez les variétés sensibles. Cette observation soulève l'hypothèse que ces gènes seraient directement impliqués dans la tolérance des végétaux au froid. Pour l'un d'entre eux, surnommé MasCla, nous avons extrait, par clonage, la protéine correspondante, afin, d'une part, de vérifier que celle-ci est bien …
Encore aujourd'hui, les mécanismes de régulation de l'expression génique par les basses températures chez les eucaryotes supérieurs sont inconnus. Nous avons identifié chez la luzerne (Medicago sativa), les cDNAs des longues 3' de 3 gènes dont l'expression est modulée positivement par le froid (MsaC1, MsaC6 et MsaC8). Les séquences nucléotidiques et les séquences protéiques correspondantes ont été déterminées pour les 3 gènes et nous avons entrepris l'étude des éléments de régulation de la transcription de MsaC8. L'un des clones génomiques isolés de MsaC8 a constitué de 2 fragments de SalI de 3,6 et 12,0 kb. Des amplifications PCR réalisées sur …