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Colloque
The genus Bacillus encompasses the Gram-positive sporeforming rod-shaped bacteria. This genus is used for the synthesis of a very wide range of important medical, agricultural, pharmaceutical and other industrial products. This includes a variety of antibiotics, enzymes, amino-acids, and sugars. Some of the Bacillus species play an important role in the biological control of insect pests. The genus Bacillus is phenotypically heterogeneous with members exhibiting an extremely wide range of nutritional requirements, growth conditions, metabolic diversity and DNA base compositions as reported in Bergey's Manual of Systematic Bacteriology. There are increasing evidences of phylogenetic heterogeneity within the genus. Till now, …
Colloque
Bacillus thuringiensis (B.t.) is a gram-positive soil bacterium characterized by its ability to produce crystalline inclusions during sporulation which consist of proteins exhibiting highly specific insecticidal activity. Crystals produced by B.t. var. kurstaki, var. israelensis and var. tenebrionis are toxic to Lepidoptera, Diptera and Coleoptera respectively. There are, however, no pesticidal bacteria toxic against plant bugs (Anthropoda: Insecta: Hemiptera) or slugs (Mollusca: Gastropoda: Pulmonata), very serious pests in cotton, fruits and vegetables in North America. Consequently, we undertook a screening program for pesticidal bacteria from dead plant bugs and slugs. As a result, several bacteria were isolated. They showed a …
Colloque
Le genre Bacillus regroupe les bactéries Gram-positives, en forme de bâtonnets, aérobies et capable de sporuler. Ce genre regroupe des espèces d'une très grande hétérogénéité, qui, phénotypiquement, couvrent un vaste spectre de besoins nutritionnels, de conditions de croissance, de diversité métabolique et de composition en bases azotées. Tout ceci tend à indiquer une hétérogénéité phylogénétique du genre. Jusqu'à présent, plusieurs méthodes ont été utilisées pour différencier les différentes espèces de Bacillus. Parce que ces méthodes ont été utilisées sur un nombre limité d'espèces, leur habileté à discriminer entre toutes les espèces Bacillus est incertaine. Récemment, des études sur certains gènes …
Colloque
L'ozone est connu pour causer des cassures simple-et double-brin dans l'ADN. Afin d'étudier l'activité matricielle de l'ADN traité à l'ozone, nous nous sommes intéressées à la réaction de transcription in vitro de l'ADN du bactériophage T7. L'ADN, extrait à partir de phages purs, a été traité à l'ozone, par barbotage, à une concentration de 5 ppm et débit de 0,05 l/min. L'activité totale ainsi que les cinétiques de transcription pour des traitements de 0, 5, 10 et 15 min mesurées par incorporation radioactive de 3H-UTP, montrent une diminution de la synthèse d'ARN en fonction du traitement d'ozone appliqué. L'ozone dans …
Colloque
Bacillus sphaericus est une bactérie gram-positive dont certaines souches peuvent produire, lors de la sporulation, une ou des inclusion(s) parasporale(s) protéinacée(s) toxique(s) pour les larves de certaines espèces de moustiques. Nous avons extrait par traitement alcalin ces protéines, dont l'entomotoxicité, de cultures sporulées de 4 souches entomopathogènes, ainsi que celles d'une souche non-pathogène de B. sphaericus. Ces extraits ont été examinés quant à leur composition selon trois critères: a) le poids moléculaire des protéines extraites, b) leur point isoélectrique (pI) en conditions non-dénaturantes, et c) leur pI en conditions dénaturantes. Nos travaux révèlent que, d'une part, les souches peuvent être …
Colloque
Nous avons utilisé la méthode de transmidation pour cloner le gène polA sauvage dans un transmidé pRRA101. Le transmidé est un plasmide-hybride (mini-Mu cI(1), pSC101), pendant la transmidation la partie de pSC101 est éliminée et substituée avec le gène cloné ainsi le transmidé devient pleinement autonome. Nous avons obtenu un transmidé, la carte de restriction prouve que le transmidé est mutant parce qu'il y a une délétion dans la partie de mini-Mu. La sélection montre que le gène polA sauvage n'a pas été exprimé. La digestion par des enzymes de restrictions EcoRI et PstI donne une bande 4.2 Kb qui …
Colloque
Nous avons utilisé Bacillus thuringiensis var. Kurustaki 4HD-1, laquelle produit une inclusion cristalline au moment de la sporulation, la δ-endotoxine, connue comme parental dans un effort pour isoler des mutants asporogènes (Spo-) cristallisères (Cry-) à partir de mutants OZ par la nitrosoguanidine (MNNG) (Sanchez, ACAFES, 58). En même temps, une étude comparative au SEM entre les différents mutants (Spo-, Cry-) et le type sauvage a été effectuée. Les mutants ont été cultivés sur milieu sporulant à 30°C, 220 rpm. Les cellules sont récoltées par centrifugation à 5,000 rpm, lavées deux fois et fixées. Les résultats montrent que le type sauvage …
Colloque
Bacillus thuringiensis et B. sphaericus sont des bacilles Gram-positifs pouvant produire, lors de la sporulation, une toxine protéique s'attaquant entre autres aux larves de diverses espèces de diptères de grande importance économique en tant que vecteurs d'un grand nombre de pathogènes affectant tant les animaux que l'être humain. La production d'insecticides à partir de ces bactéries est entravée par la faible concentration en toxine des préparations obtenues. Notre étude a consisté en la détermination, par les méthodes de l'électrophorèse en gel de polyacrylamide (PAGE) et par focalisation isoelectrique de ces extraits, des conditions de croissance visant à en rendre la …
Colloque
Afin de mieux comprendre les effets de l'ozone sur la reproduction du bactériophage T7, nous avons étudié la cinétique de la synthèse protéique du phage par l'incorporation d'acides aminés radioactifs. Des suspensions phagiques furent exposées à 50 ppm d'ozone pendant 1 à 3 minutes par barbottage direct du gaz dans les différentes suspensions. Des bactéries (Escherichia coli B) dans du bouillon Thomas et Abshon contenant 1 uCi d'un mélange d'acides aminés radioactifs L-[U-14C] furent infectées par des phages traités à l'ozone. À intervalles de temps réguliers, des échantillons de 100 ul furent déposés sur des filtres disques en fibres de …
Colloque
Dans notre laboratoire, nous avons isolé différents types de mutants (AC85) provenant de B. thuringiensis. Nous avons constaté qu'il n'y avait pas de perte d'efficacité de la protéine cristalline (l'endotoxine-δ) pour les mutants (spo-, cryI) ex. qu'il serait préférable d'utiliser un tel mutant pour l'épandage dans nos forêts, celui-ci ne pouvant survivre, contrairement au type sauvage, donc aucun danger pour l'écologie. Nous avons par la suite extrait les plasmides de B. th. et de nos mutants purifiés sur gradient de CsCl, suivi d'une électrophorèse sur gel d'agarose et comparé les différents patrons plasmidiques avec le type sauvage. Il y a …
