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Développement de vaccins chimériques bivalents dans la lutte contre les infections porcines mixtes
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Le virus du syndrome reproducteur et respiratoire porcin (VSRRP) est responsable de pertes économiques importantes dans l’industrie porcine. À l’heure actuelle, les vaccins commerciaux disponibles permettent seulement une protection partielle contre le VSRRP. Parmi les autres pathogènes du porc importants au Québec se retrouvent le circovirus porcin de type 2 (PCV2) et ''Mycoplasma'' (M.) ''hyopneumoniae'' (agent de la pneumonie enzootique). Ces deux pathogènes sont reconnus pour augmenter la sévérité et la durée des troubles respiratoires lors d’une co-infection avec le VSRRP. L’objectif du projet est de développer des vecteurs vaccinaux bivalents exprimant des protéines d’intérêt en fusion afin d’induire une …

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Étude des interactions in vitro de facteurs cellulaires avec des séquences d'ARN génomique non codantes du virus de l'artérite équine (VAE)
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Le VAE, l’agent étiologique de l’artérite équine, est un virus à ARN de polarité positive d’une longueur de 12,7 kb. Plusieurs évidences supportent le fait que des protéines soient impliquées lors de la réplication des virus à ARN, via la liaison à des séquences génomiques des extrémités 5’ et 3’ de ces derniers. Ainsi, la région leader 5’ non codante de 206 pb du VAE, tant au niveau du brin positif (+) que du brin négatif (-), montre une interaction avec une ou des protéines cellulaires, tel que déterminé par l’utilisation de gels de retardement. Par ailleurs, des mutants de …

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Effets immunorégulateurs de Propionibacterium acnes sur l’activité fonctionnelle des cellules mononucléaires de la glande mammaire chez les bovins
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Les infections intramammaires (IIM) occasionnent d’importantes pertes économiques pour l’industrie laitière. La fréquence de nouvelles IIM ainsi que la concentration de leucocytes étant plus élevées durant la période de tarissement, l’effet de l’immunostimulant commercial EqStim (Propionibacterium acnes, Vétoquinol, Québec) sur différents paramètres immunologiques des cellules mononucléaires (CMN) de la glande mammaire prélevées à cette période fut étudié. Pour ce faire, les cellules furent prélevées par un lavage de la glande mammaire en utilisant une solution saline physiologique, suivi de leur mise en culture in vitro. À l’aide d’une technique semi-quantitative de RT-PCR, les résultats obtenus ont d’abord démontré une augmentation …

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Analyse antigénique de la protéine membranaire du virus de l'artérite virale équine
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Le virus de l’artérite équine (VAE) est l’agent étiologique de l’artérite virale équine, une maladie infectieuse et persistante des équidés. Des études sérologiques antérieures ont démontré le pouvoir immunogène de la protéine membranaire (M) du VAE qui pourrait ainsi être utilisée pour la détection sérologique de chevaux infectés par le VAE. Jusqu'à présent, aucune étude n'a porté sur l'analyse antigénique de cette protéine. Dans le but d'identifier des régions contenant les sites antigéniques de la protéine M de la souche Bucyrus du VAE, l'ADN complémentaire (ADNc) spécifique de cette protéine a été inséré dans le vecteur d'expression procaryotique pGEX-4T1. Des …

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Variation génétique et analyse moléculaire de la protéine Gs du virus de l'artérite équine
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Le virus de l'artérite équine (VAE) induit une infection persistante chez les équidés. Le génome du VAE consiste en une molécule d'ARN positif à simple brin de 12,7 kb contenant 8 cadres de lecture ouvert (ORFs). Les protéines structurales du virion incluent la nucléoprotéine N de 14 kDa et trois protéines au niveau de l'enveloppe identifiées comme étant une protéine non-glycosylée M de 16 kDa, une glycoprotéine mineure GS de 25 kDa, et une glycoprotéine majeure GL de 30 à 42 kDa sur laquelle se trouve un épitope majeur inducteur d'anticorps neutralisants. Au cours de ce travail, nous avons déterminé …

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Modulation de l'activité phagocytaire des macrophages de porc par le virus SRRP et le virus influenza atypique
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Le virus du syndrome reproducteur et respiratoire du porc (SRRP), un membre des artérivirus, fut isolé au Québec en 1992. Ce virus cause des désordres reproducteurs (avortements, momifications foetales et nouveaux-nés faibles) chez les femelles de toute parité, et des désordres respiratoires chez les porcelets caractérisés par des pneumonies prolifératives interstitielles. De plus, plusieurs infections de nature secondaire peuvent être retrouvées chez l'hôte infecté avec ce virus. La cellule cible du virus SRRP est le macrophage alvéolaire (MA). Le virus influenza atypique (VIA) est aussi responsable d'un syndrome respiratoire important chez les porcelets caractérisé par une pneumonie proliférative nécrosante. Le …

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Expression et caractérisation antigénique de la protéine capsidale p26 du virus de l’immunodéficience bovine
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Le virus de l’immunodéficience bovine (VIB), un lentivirus apparenté au virus du SIDA humain, induit une infection persistante chez l’hôte en ayant comme cellule cible les macrophages. L’ADN proviral contient dans l’ordre 5’ à 3’ les gènes gag, pol et env communs à tous les rétrovirus. Dans le but de développer des réactifs pouvant servir comme substrat antigénique dans des tests de diagnostic, la séquence nucléotidique codant pour la protéine majeure capsidale du VIB, la p26, fut amplifiée par la méthode de transcription inverse-PCR (RT-PCR) et sous-clonée dans un vecteur d’expression procaryotique. Une protéine de fusion MBP (Maltose-Binding Protein)-p26 fut …

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Analyse des séquences nucléotidiques de la séquence "leader" de plusieurs souches du virus de l’artérite équine (VAE)
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Le génome du VAE, un artérivirus pouvant causer des avortements chez les juments gestantes, est un ARN simple brin de polarité positive polyadénylé d’environ 12,7 kb. Six ARN subgénomiques possédant une séquence "leader" commune dérivée de l’extrémité 5’ du génome viral, sont produits pendant la réplication virale. L’association à la virulence de la séquence "leader", qui est une région non codante, a été démontrée chez d’autres virus à ARN simple brin positifs. Dans cette étude, la séquence "leader" de plusieurs isolats du VAE dont le pouvoir abortif est variable a été analysée. Des copies d’ADNc de la séquence "leader" de …

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Détection de l’expression des gènes porcins de l’interleukine-1 bêta (IL-1 bêta), interleukine-6 (IL-6) et du facteur nécrotique de tumeur-alpha (TNF-alpha) par la technique de RT-PCR
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Les monocytes/macrophages sont des cellules immuno-compétentes qui ont un rôle d’activation du système immunitaire. Cette activation est médiée par différents facteurs solubles appelés cytokines. L’objectif de cette étude était d’évaluer l’expression de certaines de ces cytokines, soit l’IL-1 bêta, l’IL-6 et le TNF-alpha par la technique de transcription inverse-PCR (RT-PCR). Les macrophages broncho-alvéolaires ou isolées de sang périphérique de porcelets âgés de 6 à 8 semaines ont été stimulés in vitro avec du lipopolysaccharide (LPS). Les taux d’expression d’ARNm des cytokines furent déterminés par RT-PCR en comparant avec ceux d’un contrôle génique interne, la glycéraldéhyde-3-phosphate-déshydrogénase (GAPDH). Les résultats ont montré …

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Études comparatives de l'immunotoxicité du benzo(a)pyrène (BaP), de l'Aroclor, de la dieldrine et du cadmium chez la souris
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Le potentiel immunotoxique du BaP, de l'Aroclor, de la dieldrine et du cadmium a été évalué chez des souris B6AF1. Elles ont été exposées par voie orale à des doses de 10, 50 et 100 ppm durant 28 jours. L'effet sur la réponse immunitaire humorale, non-spécifique et les paramètres cellulaires sur les lymphocytes de la rate et des ganglions a été déterminé in vitro. Les cellules productrices d'anticorps ont été évaluées par la technique de plaque de lyse (PFC). La phagocytose de billes fluorescentes par les macrophages a été examinée par cytométrie en flux. Le phénotype des lymphocytes a été …

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