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Colloque
La protéine sigma3 de réovirus joue plusieurs rôles dans le cycle de multiplication du virus. Nous avons tenté d'identifier certains acides aminés impliqués dans les différentes propriétés de sigma3 en procédant à une "dissection moléculaire" de celle-ci. Le gène cloné, mutagénié par sigma3, a donc été soumis à la mutagénèse dirigée et sous-cloné dans un vecteur plasmidique permettant l'expression transitoire suite à l'introduction dans les cellules COS. Les protéines exprimées ont ensuite été détectées par immunoprécipitation et immunobuvardage. Ces expériences ont permis de démontrer que la région N-terminale de sigma3 était impliquée dans l'assemblage du virus et dans l'activité de …
Colloque
La protéine sigma3 de réovirus joue plusieurs rôles dans le cycle de multiplication du virus. Nous avons tenté d'identifier certains acides aminés impliqués dans les différentes propriétés de sigma3 en procédant à une "dissection moléculaire" de celle-ci. Le gène cloné, mutagénié par sigma3, a donc été soumis à la mutagénèse dirigée et sous-cloné dans un vecteur plasmidique permettant l'expression transitoire suite à l'introduction dans les cellules COS. Les protéines exprimées ont ensuite été détectées par immunoprécipitation et immunobuvardage. Ces expériences ont permis de démontrer que la région N-terminale de sigma3 était impliquée dans l'assemblage du virus et dans l'activité de …
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La protéine sigma3 de réovirus joue plusieurs rôles dans le cycle de multiplication du virus. Nous avons tenté d'identifier certains acides aminés impliqués dans les différentes propriétés de sigma3 en procédant à une "dissection moléculaire" de celle-ci. Le gène cloné, mutagénié par sigma3, a donc été soumis à la mutagénèse dirigée et sous-cloné dans un vecteur plasmidique permettant l'expression transitoire suite à l'introduction dans les cellules COS. Les protéines exprimées ont ensuite été détectées par immunoprécipitation et immunobuvardage. Ces expériences ont permis de démontrer que la région N-terminale de sigma3 était impliquée dans l'assemblage du virus et dans l'activité de …
Colloque
La protéine sigma 3 de réovirus est une protéine structurale du virion qui joue aussi un rôle important dans le contrôle de la synthèse protéique. On distingue deux domaines de sigma 3 : un site d'attachement au zinc et une région d'affinité pour l'ARN bicaténaire. L'ADNc codant pour la protéine a été introduit dans un vecteur plasmidique permettant l'expression transitoire du produit protéique dans les cellules eucaryotes COS-1. Nous avons confirmé que la présence de sigma 3 stimule l'expression d'un gène marqueur (CAT) présent sur un autre plasmide et cotransféré dans les mêmes cellules. La manipulation de l'ADNc permet d'exprimer …
