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Mutagénèse dirigée de la 17B-hydroxystéroïde déshydrogénase
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Les déshydrogénases à courtes chaînes, notamment la 17B-hydroxystéroïde déshydrogénase (17B-HSD), jouent un rôle important dans la biosynthèse des hormones stéroïdiennes en catalysant la formation et la dégradation d'importants stéroïdes sexuels actifs qui stimulent la prolifération des tumeurs mammaires. L'amélioration des connaissances de la relation structure/fonction de la 17B-HSD permettra de faciliter le design d'inhibiteurs efficaces et de créer un enzyme. Présentement, nous effectuons cette étude à l'aide de la mutagénèse dirigée utilisant la réaction en chaîne de la polymérase (PCR). La détermination des sites potentiels à muter est possible grâce aux informations structurales qui proviennent de la résolution des cristaux …

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Mutagénèse dirigée de la 17B-hydroxystéroïde déshydrogénase
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Les déshydrogénases à courtes chaînes, notamment la 17B-hydroxystéroïde déshydrogénase (17B-HSD), jouent un rôle important dans la biosynthèse des hormones stéroïdiennes en catalysant la formation et la dégradation d'importants stéroïdes sexuels actifs qui stimulent la prolifération des tumeurs mammaires. L'amélioration des connaissances de la relation structure/fonction de la 17B-HSD permettra de faciliter le design d'inhibiteurs efficaces et de créer un enzyme. Présentement, nous effectuons cette étude à l'aide de la mutagénèse dirigée utilisant la réaction en chaîne de la polymérase (PCR). La détermination des sites potentiels à muter est possible grâce aux informations structurales qui proviennent de la résolution des cristaux …

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Mutagénèse dirigée de la 17B-hydroxystéroïde déshydrogénase
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Les déshydrogénases à courtes chaînes, notamment la 17B-hydroxystéroïde déshydrogénase (17B-HSD), jouent un rôle important dans la biosynthèse des hormones stéroïdiennes en catalysant la formation et la dégradation d'importants stéroïdes sexuels actifs qui stimulent la prolifération des tumeurs mammaires. L'amélioration des connaissances de la relation structure/fonction de la 17B-HSD permettra de faciliter le design d'inhibiteurs efficaces et de créer un enzyme. Présentement, nous effectuons cette étude à l'aide de la mutagénèse dirigée utilisant la réaction en chaîne de la polymérase (PCR). La détermination des sites potentiels à muter est possible grâce aux informations structurales qui proviennent de la résolution des cristaux …

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La purification de la 3β-hydroxystéroïde déshydrogénase/isomérase
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La 3β-hydroxystéroïde déshydrogénase/isomérase (3β-HSD) est une protéine membranaire présente dans les microsomes ou les mitochondries. Elle possède les deux activités suivantes: la déshydrogénation et l'isomérisation. Cette enzyme est aussi responsable de la formation de la progestérone et de l'androsténédione dans les tissus périphériques. Pour étudier la relation entre la structure et la fonction de la 3β-HSD, nous avons réussi à purifier cette enzyme tout en conservant une haute activité. La 3β-HSD a été exprimée dans les cellules Sf9 en utilisant un système de baculovirus recombinant. Les cellules Sf9 ont été lysées en présence d'un détergent anionique 0.6% désoxycholate. Le surnageant …

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