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Nouvelle technologie de détection des acides nucléiques sur biopuce en une étape
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La réaction en chaine de la polymérase (PCR) en temps réel est un outil important pour la détection sensible des gènes mais est limitée par le nombre de cibles pouvant être identifiées dans un essai. La détection multiparamétrique est possible en hybridant sur une biopuce des amplicons générés lors de la PCR. L’intégration de ces réactions biochimiques dans un dispositif microfluidique est souhaitable pour permettre l’automatisation de ces processus complexes. Cependant, le nombre de chambres réactionnelles requis pour effectuer ces opérations est trop important pour permettre l’intégration à moindre coût et complexifie la fabrication du dispositif. Nous avons développé une …

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Développement d’un essai PCR multiplex en temps réel pour la détection rapide et sensible des gènes codants pour les carbapénémases
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La dissémination mondiale de bactéries à Gram négatif productrices de carbapénémases (BPC) représente une menace de santé publique majeure. Les infections causées par les BPC sont associées à un taux de mortalité élevé. Actuellement, les méthodes phénotypiques utilisées pour la détection des BPC manquent de sensibilité et de spécificité et sont souvent difficiles à interpréter. Cette étude décrit un essai PCR multiplex en temps réel permettant la détection rapide des gènes codant pour les carbapénémases les plus prévalentes. Des alignements multiples des séquences des gènes blaIMP, blaKPC, blaNDM, blaOXA48/181 et blaVIM ont été réalisés à partir des séquences disponibles dans …

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Le diagnostic rapide des maladies infectieuses d'origine hydrique
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En 2002, à l'échelle de la planète, plus de 4 millions d'enfants et d'adultes mourront d'infections microbiennes (E. coli, Salmonelle, Shigella, Cryptosporidium, choléra, etc.) causées par l'absence d'eau potable. Les méthodes phénotypiques d'identification microbienne utilisées aujourd'hui dépendent des mêmes bases biochimiques développées par Pasteur, il y a plus de 125 ans. Nous croyons que l'identification rapide (< 1h) et précise des pathogènes de l'eau révolutionnera la santé publique et sauvera des millions de vies humaines. Pour identifier les microbes en moins d'une heure, grâce à des tests diagnostiques à base d'acides nucléiques, il faut des techniques très rapides d'extraction d'ADN/ARN …

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Ciblage des réservoirs du VIH avec les immunoliposomes
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La thérapie actuellement utilisée dans le traitement de l'infection au virus de l'immunodéficience humaine (VIH) parvient à maintenir des niveaux indétectables de virus dans le plasma. Cependant, tout au long de l'infection au VIH, des particules virales demeurent présentes dans les organes lymphoïdes. Il est donc important de développer de nouvelles stratégies permettant de concentrer les médicaments dans ces tissus afin d'améliorer l'efficacité des agents antiviraux. Dans cette étude, nous avons évalué l'efficacité des liposomes, portant des anticorps à leur surface (immunoliposomes), à cibler et à concentrer les agents antiviraux dans les réservoirs du VIH. La distribution tissulaire de l'indinavir, …

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Influence de la composition de la diète sur la toxicité rénale des aminosides
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Des études antérieures faites dans notre laboratoire ont montré que le jeûne et la prise de nourriture modulent de façon significative la néphrotoxicité de la gentamicine (G). L'objectif de cette étude était de vérifier si les macronutriments de la diète influencent la toxicité rénale de G. Des rats Sprague-Dawley femelles (N=45) pesant entre 200 et 225g ont été répartis en 3 groupes (n=15) et adaptés durant 2 semaines à trois diètes différentes, soit la diète standard utilisée habituellement dans notre animalerie (diète S), ou une diète riche en protéines (45% diète S + 55% de caséine) (diète P) ou une …

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Efficacité de formulations de gel à base de foscarnet et d'acyclovir dans un modèle murin d'infection cutanée à Herpès simplex de type 1
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Le virus herpès simplex de type 1 (HSV-1) infecte principalement la peau ainsi que les systèmes nerveux périphérique et central. Bien qu'il s'agisse d'une infection bénigne chez les individus immunocompétents, les infections récurrentes à herpès sont incommodantes chez les patients sujets à de fréquents épisodes. De plus, les patients immunosupprimés présentent un risque accru de développer des infections herpétiques. Les traitements disponibles à l'heure actuelle, qu'ils soient topiques ou systémiques, ne démontrent qu'une efficacité limitée. A cet égard, nous avons évalué l'efficacité de formulations de gel contenant des agents antiviraux (foscarnet ou acyclovir) que nous avons comparée à celle de …

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Chronocinétique de la gentamicine dans un modèle de pyélonéphrite chez le rat
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Les variations circadiennes de la toxicité rénale de la gentamicine (GM) ont déjà été mises en évidence dans notre laboratoire, mais aucune étude n'a été faite concernant les variations temporelles de l'efficacité thérapeutique de la GM. L'objectif de la présente étude était d'établir une corrélation entre l'heure d'administration et l'efficacité de la GM dans un modèle expérimental de pyélonéphrite. Des rats femelles S-D (175-215 g) ont été divisés en 4 groupes (n=20/groupe). Les animaux avaient libre accès à la nourriture et étaient maintenus sur un cycle 14:10 lumière:obscurité (lumière allumée: 06h00). La pyélonéphrite fut induite à 07h00, 13h00, 19h00 ou …

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Toxicité de l'endotoxine (LPS), du TNFα et de l'interleukine-1β (IL-1β) sur des cellules primaires de cellules du tubule proximal rénal (CTP)
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Le choc septique et les lésions rénales qui en résultent en réponse au LPS bactérien, sont largement médiés par TNF et IL-1. On a étudié in vitro la toxicité de LPS, TNF ou IL-1β, de même que l'implication du LPS et de ces cytokines dans ces processus. Nous avons investigué les effets toxiques du LPS, du TNF et de l'IL-1 individuellement ou en combinaison, sur des CTP rénaux cultivés jusqu'à la confluence dans un milieu sans sérum. La viabilité cellulaire était estimée par le test au MTT. Exposition des cellules Viabilité cellulaire (% par rapport au contrôle) LPS, 100 μg/ml …

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Utilisation de liposomes modifiés avec du polyéthylèneglycol ("Stealth®") pour le transport d'agents antiviraux
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Les liposomes constituent un système de transport efficace pour distribuer de façon sélective divers agents thérapeutiques vers leurs cibles cellulaires. Nous avons récemment démontré que l'encapsulation du didanosine (ddI) dans les liposomes permet de contourner l'engrant antiviral vers certains sites d'infection tout en augmentant de 300 fois son temps de demi-vie dans la circulation sanguine chez le rat. Cependant, la fixation de molécules de polyéthylèneglycol à la surface des liposomes (liposomes "Stealth") constitue une approche intéressante afin d'améliorer davantage la pharmacocinétique des liposomes. L'objectif de cette étude consiste donc à la mise au point de liposomes "Stealth®" afin d'améliorer la …

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Encapsulation d'agents antiviraux dans les liposomes
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Un des principaux facteurs limitant l'utilisation d'agents thérapeutiques pour le traitement de l'infection causée par le virus de l'immunodéficience humaine (VIH) est leur toxicité. Les liposomes constituent un système de transport efficace pour distribuer de façon sélective divers médicaments vers les sites de l'infection virale, augmentant par le fait même leur efficacité tout en limitant leur toxicité. L'objectif de cette étude consiste à la mise au point de premiers liposomes permettant d'optimiser le pourcentage d'encapsulation et le degré de rétention de divers agents anti-VIH, soit l'azidothymidine (AZT) et le didanosine (ddI). Nous avons donc évalué le taux d'incorporation de ces …

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