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Les canaux K+, dont l'activité dépend de la concentration cytosolique de Ca2+ (K(Ca2+)), se divisent en trois classes distinctes selon leur conductance; les Maxi K(Ca2+) dont la conductance est >100 pS, les canaux IK(Ca2+) de conductance intermédiaire (20 pS-50pS) et les canaux de très faible conductance (<10 pS). Nos travaux en "patch-clamp" ont porté essentiellement sur la caractérisation moléculaire d'un canal IK(Ca2+) de 40 pS exprimé dans les cellules endothéliales BAE et dans les cellules HeLa. Les résultats obtenus ont permis premièrement de mettre en évidence que l'activité de ce canal était indépendante du potentiel membranaire et que la courbe …
Le mode d'action des toxines entomopathogènes du bacille de Thuringe demeure peu connu. Nous avons établi que parmi ces protéines, CrylC et CrylA(c), spécifiques aux lépidoptères, créent des canaux ioniques de 25 à 30 pS dans des membranes cellulaires de 350 à 600 pS dans des bicouches lipidiques planes, induisent une augmentation du calcium intracellulaire (100 à 600 nM) et dérégulent le pH intracellulaire des cellules de lépidoptères (Spodoptera frugiperda et Spodoptera exigua). Au moyen de la microscopie confocale, nous montrons que la CrylA(c) et la CrylC provoquent, dans différentes cellules de lépidoptères (CF-1, SF-9, UCR-SE-IA), des altérations structurales et …
Le mode d'action des toxines entomopathogènes du bacille de Thuringe demeure peu connu. Nous avons établi que parmi ces protéines, CrylC et CrylA(c), spécifiques aux lépidoptères, créent des canaux ioniques de 25 à 30 pS dans des membranes cellulaires de 350 à 600 pS dans des bicouches lipidiques planes, induisent une augmentation du calcium intracellulaire (100 à 600 nM) et dérégulent le pH intracellulaire des cellules de lépidoptères (Spodoptera frugiperda et Spodoptera exigua). Au moyen de la microscopie confocale, nous montrons que la CrylA(c) et la CrylC provoquent, dans différentes cellules de lépidoptères (CF-1, SF-9, UCR-SE-IA), des altérations structurales et …
Le mode d'action des toxines entomopathogènes du bacille de Thuringe demeure peu connu. Nous avons établi que parmi ces protéines, CrylC et CrylA(c), spécifiques aux lépidoptères, créent des canaux ioniques de 25 à 30 pS dans des membranes cellulaires de 350 à 600 pS dans des bicouches lipidiques planes, induisent une augmentation du calcium intracellulaire (100 à 600 nM) et dérégulent le pH intracellulaire des cellules de lépidoptères (Spodoptera frugiperda et Spodoptera exigua). Au moyen de la microscopie confocale, nous montrons que la CrylA(c) et la CrylC provoquent, dans différentes cellules de lépidoptères (CF-1, SF-9, UCR-SE-IA), des altérations structurales et …
Le mode d'action des toxines entomopathogènes du bacille de Thuringe demeure peu connu. Nous avons établi que parmi ces protéines, CrylC et CrylA(c), spécifiques aux lépidoptères, créent des canaux ioniques de 25 à 30 pS dans des membranes cellulaires de 350 à 600 pS dans des bicouches lipidiques planes, induisent une augmentation du calcium intracellulaire (100 à 600 nM) et dérégulent le pH intracellulaire des cellules de lépidoptères (Spodoptera frugiperda et Spodoptera exigua). Au moyen de la microscopie confocale, nous montrons que la CrylA(c) et la CrylC provoquent, dans différentes cellules de lépidoptères (CF-1, SF-9, UCR-SE-IA), des altérations structurales et …
La technique de "patch clamp" nous a permis de mettre en évidence la présence d'un canal potassique (PK/PNa = 17) à rectification anormale dont les conductances pour les courants entrants et sortants sont respectivement de 50 pS et 10 pS en condition symétrique de KCl (200 mM). Les courbes I-V obtenues pour différentes concentrations de KCl externe ont été interprétées en fonction d'un modèle à 2 barrières-1 site. Le calcium interne active le canal à des concentrations de 0.1 à 1 µM non pas en augmentant la durée moyenne des ouvertures mais surtout en augmentant le taux d'ouverture du canal; …
Les effets du Ba++ et de la quinine sur les courants ioniques au travers du canal K+ activé par le Ca++ ont été étudiés par la méthode du "patch clamp" dans les configurations de "cell attached" et "inside-out". L'action de ces agents a été étudiée en condition symétrique de KCl (200 mM) à des concentrations micromolaires de calcium interne. Les courbes I/V démontrent que le Ba++ et la quinine ont peu d'effet sur l'amplitude des sauts de courant. Cependant, l'analyse de la distribution des temps d'ouverture et de fermeture montre que le Ba++ en milieu interne ou externe diminue le …