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Colloque
Des protoplastes ont été isolés à partir d'aiguilles de tiges âgées in vitro, multipliées sur un milieu avec addition de 1x10^6 M d'AIB (acide indolebutyrique) et 5x10^6 M de BAP (6-benzylaminopurine). Ce système organogène provenant de bourgeons de rameaux courts prélevés sur des boutures d'un arbre de 8 ans. Le meilleur rendement (2.2 x 10^7 protoplastes/g de matériel frais) et le pourcentage le plus élevé de viabilité (84.3%) ont été obtenus après digestion des aiguilles dans un mélange enzymatique contenant 0.5% de Cellulase R-10, 0.5% de Macérozyme R-10 et 0.5% d'albumine bovine (ASB). Le diamètre des protoplastes est très hétérogène …
