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Communication
L'Amphotéricine B est un antifongique largement utilisé pour le traitement des mycoses profondes. Ce médicament agit en se liant avec l'ergostérol contenu dans les membranes des champignons. Il interagit également avec le cholestérol, ce qui explique que ce médicament soit toxique. L'objectif visé par ce projet de recherche est de vérifier les bases physico-chimiques d'une hypothèse récemment proposée (Feigin A.M., Med. Hypotheses (1999), 52 (5), 383-388.) à l'effet que l'Amphotéricine B pourrait être utilisé pour le traitement de certains types de cancer, notamment du carcinome hépatocellulaire, à condition de remplacer le cholestérol par son précurseur biosynthétique, le 7-Déhydrocholestérol (7-DHC). Dans …
Communication
L'Amphotéricine-B (AmB) est un antifongique très utilisé pour le traitement des mycoses profondes. Ce médicament agit en se liant avec l'ergostérol contenu dans les membranes de champignons. Il interagit aussi, dans une moindre mesure, avec le cholestérol d'où sa toxicité. Nous voulons donc expliquer les bases moléculaires de cette sélectivité d'interaction et pour ce faire, nous avons utilisé un système liposomal de phosphatidylcholine (DPPC) avec ou sans stérols. Nous avons varié la concentration de chacun des stérols tout en gardant celle de l'AmB stable afin d'étudier l'effet de la fluidité membranaire sur l'affinité de l'AmB avec chacun des systèmes. Les …
Colloque
L’actine est une protéine que l’on retrouve dans la plupart des cellules où elle a deux fonctions; c’est une protéine impliquée dans les phénomènes de motilité et un des composants du cytosquelette. Il est reconnu dans la littérature, que les microfilaments d’actine sont attachés aux membranes par l’intermédiaire de protéines membranaires. Cependant, nous avons aussi montré que, in vitro, l’actine peut se fixer directement aux lipides membranaires. Dans ce travail, nous avons étudié l’interaction entre l’actine et les lipides, par la technique des monocouches et par microscopie électronique. Les résultats montrent que, à basse pression de surface, l’actine remonte en …
Colloque
L’Amphotéricine-B est un fongicide fréquemment utilisé dans le traitement des infections systémiques. Il agit en se liant à l’ergostérol contenu dans les membranes de champignons. Il interagit aussi, dans une moindre mesure, avec le cholestérol contenu dans les membranes de mammifères, d’où sa toxicité. Dans le but de mieux comprendre cette sélectivité d’action de l'AmB envers les stérols, nous avons utilisé la calorimétrie différentielle à balayage ainsi que deux techniques spectroscopiques, soit la RMN du deutérium et la FTIR. Les études calorimétriques permettent d’établir que l’AmB seule structure les membranes lipidiques en formant une phase particulière dans la bicouche lipidique, …
Colloque
L'Amphotéricine-B (AmB) est un médicament utilisé dans le traitement d'infections fongiques. Ce médicament agit en se liant à l'ergostérol contenu dans les membranes des champignons. Il interagit aussi, dans une moindre mesure, avec le cholestérol, d'où sa toxicité. Nous voulons donc expliquer les bases moléculaires de cette sélectivité d'interaction. Pour ce faire, nous procédons à l'analyse de préparations liposomales de phosphatidylcholine (DPPC) avec ou sans stérols, contenant des quantités variables d'AmB. Les techniques utilisées sont la calorimétrie différentielle à balayage et la spectroscopie UV-visible. Les résultats calorimétriques montrent que l'AmB forme une phase particulière dans la bicouche lipidique, en stabilisant …
Colloque
Nous présentons l'étude du processus d'orientation d'une sonde de fluorescence, le 12-9(AS), dans une monocouche de DPPC à l'interface air/solution. Ce processus est représenté par un paramètre d'orientation qui provient du rapport de deux constantes de diminution de la sonde obtenue par polarisation croisée de la lumière d'excitation. Ce paramètre d'orientation montre trois régions de configurations orientionnelles lors de la compression du film de DPPC. Ces régions sont séparées par deux changements abrupts du paramètre, l'un localisé au point de la région de transition LE/LC (0,58 nm²mol⁻¹) et le second à la fin de la région de transition LC/SC (0,48 …
Colloque
Dans le but de mieux lire les interactions entre hélices-α dans les protéines hélicoïdales, nous avons étudié les isothermes de pression et de potentiel de surface de deux homopolypeptides hydrophobes organisés en hélice-α, le poly-L-alanine et la poly-L-leucine. Les résultats des isothermes sont analysés au moyen d'un modèle géométrique simple qui permet le calcul des rayons interne et externe des hélices-α. À partir de ces deux rayons, il est possible de déterminer la distance entre deux hélices adjacentes. Nous montrons que les aires résiduelles se décomposent lors d'un repli des polypeptides correspondant à une organisation croisée des hélices-α. En réduisant …
Colloque
L'effet de l'amphotéricine B, à diverses concentrations, sur des membranes phospholipidiques unilamellaires, a été étudié en observant, à l'aide de mesures de fluorescence, l'efflux de la carboxyfluorescéine, particulièrement encapsulée dans les vésicules lipidiques, préparées soit par sonication, soit par ultrafiltration. Dans le but d'étudier la sélectivité de l'AmB envers les stérols, du cholestérol ou de l'ergostérol a été incorporé dans les vésicules lipidiques à diverses proportions. Pour les vésicules unilamellaires larges (LUV) aussi bien que pour les petites vésicules (SUV), nous avons essentiellement constaté que les vésicules de phospholipides incluant des stérols sont nettement plus sensibles à l'action de l'AmB …
Colloque
Les membranes biologiques sont asymétriques en composition lipidique et protéique. Une des conséquences de cette asymétrie est l'existence d'un potentiel transmembranaire au travers de la bicouche, potentiel dont on commence à reconnaître l'importance fonctionnelle. Dans le but de caractériser ce potentiel transmembranaire, nous avons étudié les caractéristiques courants-ion de la cinétique de Montal-Mueller. Les bicouches lipidiques furent dopées à la nonactine, un transporteur d'ions. Les courants-ion des ces bicouches dopées permettent d'évaluer la caractéristique de la barrière de potentiel trapézoïdale choisie comme modèle pour reproduire ce profil de potentiel au travers la bicouche. Ce cas particulier de barrière de potentiel …
Colloque
La formation de membranes asymétriques selon la technique de Montal-Mueller consiste en l'adjonction de deux monocouches de lipides au niveau d'une ouverture percée au travers d'un support hydrophobe séparant deux phases aqueuses. Disposant d'un montage permettant la reconstitution de membranes selon cette méthode, nous avons étudié la capacitance de membranes modélisées de phosphatidyléthanolamine (PE)/phosphatidylsérine (PS) formées sur un support en Téflon de différentes épaisseurs. Pour des épaisseurs variant de 6 à 50 μm nous notons une augmentation de la capacitance spécifique de l'ordre de 15%. La mesure de la capacitance spécifique ne prend dès lors toute sa signification que lorsqu'on …
