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Colloque
Sous l'effet de la lumière visible, la BR agit comme une pompe vectorielle qui transfère des protons de l'intérieur vers l'extérieur de la membrane bactérienne. Cette transformation énergétique du rayonnement solaire en un gradient électrochimique de protons est associée de part et d'autre à une série discrète de réactions chimiques et d'autre part à une activité électrique interne. Dans un système orienté, on mesure des courants de déplacement de charges suite à une brève excitation lumineuse. Le signal photoélectrique ainsi détecté est composé de deux phases : une première phase négative montrant une seule composante électrique due à l'isomérisation du …
Colloque
La protéine transmembranaire d'origine bactérienne bactériorhodopsine possède des propriétés photochimiques exceptionnelles. Suite à l'absorption d'un photon lumineux par son chromophore, la bactériorhodopsine entre dans un photocycle qui mène éventuellement au pompage d'un proton d'un côté à l'autre de la membrane. In vitro, cette translocation de protons contribue à former un gradient de pH de part et d'autre de la membrane, lequel permettra ensuite la formation d'ATP grâce aux ATP synthétases présentes dans la membrane. Depuis quelques années déjà, on pense pouvoir se servir des caractéristiques de cette protéine afin de construire un photodétecteur biologique ou d'autres éléments d'optœlectronique à base …
Colloque
La bactériorhodopsine est un pigment rétinien présent dans la membrane de certaines bactéries halophiles extrêmes qui, sous l'effet de la lumière, réalise le pompage de protons au travers de la membrane cellulaire. La transformation de l'énergie du rayonnement électromagnétique en gradient de protons est effectuée avec un rendement quantique élevé et permet une grande discrétion de dissipation de l'énergie initialement stockée lors de l'excitation du chromophore du pigment. Dans un système orienté, le courant de déplacement de charge associé au pompage de protons peut être mesuré. Nous avons élaboré un dispositif qui permet de telles mesures dans l'échelle de temps …
Colloque
L'absorption de lumière par la bactériorhodopsine y déclenche une activité photochimique cyclique à laquelle est couplé le pompage transmembranaire d'un proton. Lorsqu'elle est délipidée ou incorporée dans des vésicules lipidiques dont la composition en chaînes grasses est différente de celle des membranes pourpres, la bactériorhodopsine existe sous deux formes spectrales en équilibre (λmax 480 nm et λmax 570 nm) qui possèdent toutes deux une activité photochimique complète où tous les états transitoires nécessaires au pompage des protons sont présents. Néanmoins, il semble impossible de mettre en évidence une activité de pompage de protons par la forme 480 nm de la …
Colloque
L'absorption de lumière par la bactériorhodopsine y déclenche une activité photochimique cyclique à laquelle est couplé le pompage transmembranaire d'un proton. Lorsqu'elle est délipidée ou incorporée dans des vésicules lipidiques dont la composition en chaînes grasses est différente de celle des membranes pourpres, la bactériorhodopsine existe sous deux formes spectrales en équilibre (λmax 480 nm et λmax 570 nm) qui possèdent toutes deux une activité photochimique complète où tous les états transitoires nécessaires au pompage des protons sont présents. Néanmoins, il semble impossible de mettre en évidence une activité de pompage de protons par la forme 480 nm de la …
Colloque
L'incorporation d'anesthésiques volatils halogénés comme l'enflurane et l'halothane aux membranes pourpres provoque des modifications importantes de la structure et de la fonction de la bactériorhodopsine, seule protéine intrinsèque de ces membranes. Jusqu'à maintenant, on a cru que cet effet résultait de l'interaction directe entre l'anesthésique et la protéine membranaire et que ce système pouvait constituer un bon modèle expérimental pour l'étude des interactions anesthésiques/membranes. Toutefois, l'effet des anesthésiques sur ces membranes peut être mimé par toute une série de solvants organiques incluant des cétones, des alcools et des alcanes. Considérant de plus que la bactériorhodopsine contenue dans les membranes traitées …
Colloque
La bactériorhodopsine (bR) est le pigment protéique responsable de la coloration de la membrane pourpre chez les halobactéries du genre Halobium. À la lumière, cette protéine pompe des protons au travers de la membrane plasmique; cette activité fournit l'énergie nécessaire au métabolisme de la cellule. En absence d'interaction avec les lipides, la bR existe sous deux formes spectrales distinctes, une forme pourpre (λ max = 560-565nm) et une forme rouge (λ max = 480nm). Nous avons comparé l'activité photochimique et le pompage de proton par ces deux formes. Nos résultats indiquent qu'en dépit d'une activité photochimique complète, la forme rouge …
Colloque
La RMN-N-15 est utilisée pour déterminer l'état de protonation de l'azote dans la liaison amidine qui relie le rétinal à la lysine 216 dans la bactériorhodopsine. Compte tenu du peu de succès obtenu jusqu'ici par diffusion de neutrons en utilisant cette technologie avec des suspensions aqueuses de bactériorhodopsine, il devient important d'étudier plusieurs paramètres. Dans ce contexte, considération du i) du temps de relaxation, ii) de l'angle de mutation, iii) du délai de pulsation, iv) de la température, v) de l'effet NOE et vi) de la substitution isotopique des protons par des deutérons, permet de croire que cette technique peut …
Colloque
La rhodopsine est le complexe retinal-protéine responsable de la conversion de l'énergie lumineuse dans le processus visuel. L'absorption d'énergie lumineuse déclenche dans ce pigment une série de réactions où les intermédiaires suivants apparaissent: Rhodopsine hv, Prérhodopsine →→ Lumirhodopsine →→ Métarhodopsine I →→ Métarhodopsine II. Nous avons purifié la rhodopsine bovine en utilisant comme détergents des esters de sucrose et d'acides gras de longueur de chaîne variant de 8 à 22 atomes de carbones. La rigidité des micelles formés par ces détergents augmente avec la longueur de chaîne et influence non seulement la cinétique et l'équilibre de la réaction rhodopsine I …
Colloque
Il a été proposé récemment (1) que l'unité fonctionnelle opérant la transduction de l'énergie lumineuse au cours du processus visuel, soit constituée d'un agrégat de 12 molécules de rhodopsine. Afin de savoir si l'état d'agrégation pouvait affecter les propriétés photochimiques du pigment visuel, nous avons préparé, par différentes techniques, des agrégats de rhodopsine dépourvus de phospholipides et de détergents. Dans ces agrégats, la décoloration photochimique des pigments visuels est incomplète, elle s'arrête généralement à l'état métarhodopsine I et un équilibre photoisomérisation semble exister entre la métarhodopsine I et la rhodopsine. Les plus gros de ces agrégats peuvent atteindre 1 µm …
