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Caractérisation du profil d’expression génique des glioblastomes multiformes par biopuces d’ADN et altération du profil par le tamoxiphène
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Le glioblastome multiforme (GBM) est une tumeur gliale du cerveau qui demeure dévastatrice malgré l’avènement de nouvelles modalités thérapeutiques. L’élucidation des mécanismes moléculaires nous permettra de mieux comprendre l’oncogenèse et d’orienter les démarches thérapeutiques. Nous avons utilisé une biopuce d’ADN pour examiner le profil d’expression de GBM provenant de biopsies de patients. Parmi les 1700 gènes soumis au criblage, un sous-ensemble de 32 gènes présente une hybridation différentielle significativement altérée par comparaison à du tissu cérébral sain. Trente de ces gènes sont significativement surexprimés dans les GBM dont la glycophorine B qui atteint le plus haut niveau d’expression relative. Seulement …

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Caractérisation des ADNc de la protéine StAR de hamster
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La protéine StAR ("Steroidogenic Acute Regulatory Protein") facilite l'apport du cholestérol au cytochrome P450scc ("Side-Chain Cleavage") dans la mitochondrie. Ce dernier transforme le cholestérol en pregnénolone. Cette étape de la synthèse des stéroïdes est considérée par plusieurs auteurs comme étant l'étape limitante de toute la stéroïdogénèse. La protéine StAR a récemment été clonée chez l'humain et la souris. Dans le but de mieux comparer la structure de cette nouvelle protéine, nous avons cloné plusieurs ADNc à partir d'une librairie de surrénales de hamster. Des buvardages de type northern nous démontrent la présence de plusieurs messagers. De plus, une seule injection …

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Caractérisation des ADNc de la protéine StAR de hamster
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La protéine StAR ("Steroidogenic Acute Regulatory Protein") facilite l'apport du cholestérol au cytochrome P450scc ("Side-Chain Cleavage") dans la mitochondrie. Ce dernier transforme le cholestérol en pregnénolone. Cette étape de la synthèse des stéroïdes est considérée par plusieurs auteurs comme étant l'étape limitante de toute la stéroïdogénèse. La protéine StAR a récemment été clonée chez l'humain et la souris. Dans le but de mieux comparer la structure de cette nouvelle protéine, nous avons cloné plusieurs ADNc à partir d'une librairie de surrénales de hamster. Des buvardages de type northern nous démontrent la présence de plusieurs messagers. De plus, une seule injection …

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Caractérisation des ADNc de la protéine StAR de hamster
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La protéine StAR ("Steroidogenic Acute Regulatory Protein") facilite l'apport du cholestérol au cytochrome P450scc ("Side-Chain Cleavage") dans la mitochondrie. Ce dernier transforme le cholestérol en pregnénolone. Cette étape de la synthèse des stéroïdes est considérée par plusieurs auteurs comme étant l'étape limitante de toute la stéroïdogénèse. La protéine StAR a récemment été clonée chez l'humain et la souris. Dans le but de mieux comparer la structure de cette nouvelle protéine, nous avons cloné plusieurs ADNc à partir d'une librairie de surrénales de hamster. Des buvardages de type northern nous démontrent la présence de plusieurs messagers. De plus, une seule injection …

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Caractérisation des ADNc de la protéine StAR de hamster
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La protéine StAR ("Steroidogenic Acute Regulatory Protein") facilite l'apport du cholestérol au cytochrome P450scc ("Side-Chain Cleavage") dans la mitochondrie. Ce dernier transforme le cholestérol en pregnénolone. Cette étape de la synthèse des stéroïdes est considérée par plusieurs auteurs comme étant l'étape limitante de toute la stéroïdogénèse. La protéine StAR a récemment été clonée chez l'humain et la souris. Dans le but de mieux comparer la structure de cette nouvelle protéine, nous avons cloné plusieurs ADNc à partir d'une librairie de surrénales de hamster. Des buvardages de type northern nous démontrent la présence de plusieurs messagers. De plus, une seule injection …

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Activités du cytochrome P450c17 de surrénales de hamster
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La synthèse des stéroïdes dans le cortex surrénalien est médiée par plusieurs cytochromes P450. Une de ces enzymes, le cytochrome P450c17 (P450c17), est responsable de deux activités, la 17alpha-hydroxylation et la 17,20-lyase. Chez l'humain, le produit majeur résultant de ces activités est la déshydroépiandrostérone (DHEA). Contrairement au rat et à la souris, le hamster exprime le P450c17 au niveau surrénalien. Nous avons cloné le P450c17 à partir d'une librairie d'ADNc de surrénale de hamster. Nous avons ensuite exprimé ce clone dans des cellules COS 1 à l'aide du vecteur pSV€SPORT 1. Les cellules ont été incubées en présence de [14C]pregnénolone,[14C]progestérone …

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Clonage de l’ADNc du récepteur de l’adrénocorticotropine de surrénale de hamster
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Le hamster, contrairement au rat et à la souris, est capable de synthétiser des stéroïdes C19 dans sa surrénale car celle-ci exprime le cytochrome P450c17. Le hamster est donc un excellent modèle pour étudier la stéroïdogenèse surrénalienne car celle-ci reflète mieux ce que l’on retrouve chez l’humain. L’adrénocorticotropine est une hormone hypophysaire qui contrôle la sécrétion des stéroïdes au niveau du cortex surrénalien. Dans le but de mieux étudier l’implication du récepteur dans la sécrétion des stéroïdes surrénaliens, nous avons procédé au clonage de l’ADNc à partir d’une librairie d’ADNc de surrénale de hamster. Pour ce faire, nous avons utilisé …

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Caractérisation dans la surrénale de cobaye d'un ADNc pleine longueur codant pour le cytochrome P450c21
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Chez l'humain et plusieurs mammifères, le cytochrome P450c21 catalyse une activité essentielle en transformant la progestérone (P) et la 17α-OHP en désoxycorticostérone et déoxycortisol précurseurs des minéralocorticoïdes et des glucocorticoïdes. Nous avons cloné et séquencé un ADNc de dicotomie entre l'induction des messagers P450c21 et l'activité 21-hydroxylase en réponse à l'ACTH dans la surrénale de cobaye, afin de déterminer le rôle régulé par l'ACTH sur l'expression de ce gène, en utilisant un procédé de clonage de l'ADNc. Une banque diversifiée d'ADNc, préparée à partir d'ARN poly (A)+ de surrénale de cobaye a été clonée dans λgt22 et criblée avec un …

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Caractérisation dans la surrénale de cobaye d'un ADNc pleine longueur codant pour le cytochrome P450c21
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Chez l'humain et plusieurs mammifères, le cytochrome P450c21 catalyse une activité essentielle en transformant la progestérone (P) et la 17α-OHP en désoxycorticostérone et déoxycortisol précurseurs des minéralocorticoïdes et des glucocorticoïdes. Nous avons cloné et séquencé un ADNc de dicotomie entre l'induction des messagers P450c21 et l'activité 21-hydroxylase en réponse à l'ACTH dans la surrénale de cobaye, afin de déterminer le rôle régulé par l'ACTH sur l'expression de ce gène, en utilisant un procédé de clonage de l'ADNc. Une banque diversifiée d'ADNc, préparée à partir d'ARN poly (A)+ de surrénale de cobaye a été clonée dans λgt22 et criblée avec un …

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