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Communication
L'activation de l'ovocyte par le spermatozoïde fécondant est provoquée, initialement, par une série d'oscillations dans la concentration intracellulaire de calcium. Le mécanisme par lequel le spermatozoïde entraîne ces réponses calciques chez l'ovocyte demeure, à ce jour, inconnu. Les deux principales hypothèses évoquent soit un facteur protéique spermatique soluble transmis à l'ovocyte lors de la fusion, soit une interaction de type ligand-récepteur au niveau de la membrane plasmique de l'ovocyte. Parmi les protéines spermatiques candidates comme facteur activateur soluble potentiel, certains travaux suggèrent que la protéine tr-kit pourrait jouer ce rôle. Cette protéine spermatique tr-kit est, en fait, un variant tronqué …
Colloque
Chez la palourde Spisula solidissima, la sérotonine induit la ponte lorsqu’injectée dans les gonades, accroît la fécondabilité des ovocytes pré-traités et, à plus forte concentration, peut même induire la reprise de la méïose qui est normalement déclenchée par la fécondation. Afin de mieux comprendre globalement les rôles physiologiques de la sérotonine dans la reproduction de la palourde, nous avons localisé et quantifié la sérotonine dans les gonades au cours de la gamétogénèse et durant l’embryogénèse, par immunohistochimie et chromatographie liquide à haute pression. À l’aide d’un anticorps anti-sérotonine, des fibres sérotoninergiques sont observés au niveau de la paroi alvéolaire des …
Colloque
La reprise de la méïose chez les ovocytes en prophase I de la palourde, Spisula solidissima, est normalement déclenchée par la fécondation mais peut aussi l’être par l’ajout de KCl ou de sérotonine. Les ions K+ provoquent une dépolarisation membranaire permettant l’ouverture de canaux calciques tandis que la sérotonine se lie à des récepteurs spécifiques généralement couplés à des protéines-G. Celles-ci sont elles-mêmes souvent associées à la voie de signalisation de l’AMP cyclique (AMPc). Notre étude a pour but de clarifier l’intervention potentielle de l’AMP cyclique après la fécondation, ou l’activation artificielle par le KCl ou la sérotonine. Des pré-traitements …
Colloque
Le mécanisme d’activation des ovocytes lors de la fécondation chez les mammifères est mal connu. L’une des hypothèses est que l’augmentation du Ca2+ intracellulaire des ovocytes serait induite via l’injection par le spermatozoïde d’une protéine activatrice, «l’oscilline», récemment caractérisée chez le hamster doré. Notre objectif est de vérifier l’universalité de la distribution et des fonctions de l’oscilline, en utilisant la souris comme modèle expérimental. Basé sur la séquence connue de l’oscilline de hamster et de séquences apparentées chez l’humain et E.coli, des oligonucléotides dégénérés nous ont permis, par RT-PCR en utilisant des ARNm de testicules de souris, d’obtenir un fragment …
Colloque
Le cycle cellulaire se compose de quatre phases: G1 pour le "gap" avant réplication, S pour la synthèse de l'ADN, G2 pour le "gap" avant division, et M pour la mitose. Le contrôle de la progression du cycle fait intervenir une cascade de phosphorylations/déphosphorylations, dont un élément-clé, le MPF (pour "M-phase promoting factor") est composé de la protéine kinase p34cdc2 et d'une sous-unité régulatrice, cycline. L'inhibition des phosphorylations par la 6-Diméthylaminopurine (6DMAP) conduit toute cellule à un stade de quiescence. Une augmentation de la taille des noyaux dans les œufs d'oursin ou une multiplication des tétrades dans les oocytes de …
Colloque
Suite à la fixation ou à la fusion du spermatozoïde fécondant à la membrane plasmique de l'ovocyte, l'activation (ou l'inactivation) du M-phase promoting factor (MPF) met en branle la reprise de la méiose suivie des mitoses accélérées de l'embryon précoce. Les ovocytes de la palourde Spisula, un mollusque bivalve, constituent un modèle de choix pour analyser comment des modifications intracellulaires du Ca++ et du pH peuvent ou non servir d'intermédiaires entre les interactions membranaires initiales et la mobilisation subséquente du MPF. En effet, chez cette espèce, nos travaux indiquent qu'un influx de Ca++ externe, suivi vraisemblablement d'une libération intracellulaire, est …
Colloque
Le pétoncle géant, Placopecten magellanicus, est un bivalve à sexes séparés et à fécondation externe qui est commun dans les eaux du Golfe Saint-Laurent. Malgré l’importance commerciale de cette espèce, très peu d’information est disponible concernant la biologie de son développement. Pour combler cette lacune, l’ultrastructure des gamètes et la biologie du début du développement des embryons ont été analysées en microscopie électronique. Un matériel biologique de choix, le pétoncle géant, est induit à la ponte en laboratoire par des chocs thermiques, les pontes d’un même mâle contenant 72 µm de spermatozoïdes, et celles d’une femelle environ 70 µm d’ovocytes …
Colloque
La triploïdie, soit 3n chromosomes au lieu de la situation normale 2n (diploïde), a pour effet de produire des individus qui ne peuvent pas développer d'organes reproducteurs, l'énergie étant alors entièrement consacrée à la croissance somatique, d'où l'intérêt de la technique pour la production d'espèces comestibles et commercialisables. Le 6-diméthylaminopurine est un inhibiteur des phosphorylations protéiques, processus essentiels au déroulement normal de la méiose, et dont les effets sont partiellement réversibles à la suite d'une courte période de traitement. La triploïdie a été induite chez la moule et le pétoncle en incubant les zygotes fécondés au chant 12 minutes après …
Colloque
Des ovules d'oursin ont été traités avec diverses concentrations de procaine et d'aminoacide, deux bases faibles qui augmentent la valeur du pH intracellulaire (pHi) proportionnellement à la concentration finale utilisée. Aux concentrations induisant une augmentation du pHi à une valeur équivalente à celle atteinte après fécondation, le taux de synthèse protéique demeure inférieur à celui observé chez les œufs fécondés. Aussi, aucun changement dans la quantité totale d'actine monomérique (actine-G) n'a été enregistré. Des résultats similaires ont été obtenus après traitement des ovules avec le promoteur de tumeur TPA, connu pour augmenter le pHi via l'activation de l'échangeur membrane Na-H. …
