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Colloque
Les gènes de résistance aux β-lactamines font partie de transposons complexes et des études phylogénétiques suggèrent qu'ils sont souvent apparentés au transposon Tn21. Nous avons démontré que Tn21 possède une fonction tnpI, intégrase, permettant l'acquisition de gènes de résistance aux antibiotiques. Par clonage directionnel dans le plasmide pACYC184, nous avons isolé un fragment d'ADN BamHI-HindIII de 2.8 Kb comprenant tnpI et aadA de Tn21. La cartographie, la délétion de fragments d'ADN et la génèse in vivo de ce fragment en utilisant pOX38Km+ et les plasmides construits ont permis de localiser tnpI dans 2 fragments BamHI-AvaI-AvaI de 1.3 Kb. La détermination …
Colloque
Nous postulons que la genèse de novo de transposons multirésistants chez les bactéries Gram négatif implique l'existence d'une région spécifique permettant l'acquisition de gènes de résistance. Par clonage directionnel dans le plasmide pACY184, nous avons isolé un fragment cryptique d'ADN BamHI-NruI de 1,45 kb adjacent au gène ß-lactamase OXA-2. La carte physique détaillée du plasmide recombinant pMON23 a été construite en utilisant 10 enzymes de restriction. Une homologie structurale entre les fragments d'ADN adjacents à 16 gènes ß-lactamases différentes a été confirmée par hybridation moléculaire en utilisant les fragments d'ADN BamHI-AvaI (600 bp) et AvaI-EcoRI (650 bp) de pMON23 comme …
Colloque
Pseudomonas maltohphilia est l'une des seules espèces bactériennes résistante à l'imipenem (N, N-formimidyl thienamycine). Nous remarquons une activité enzymatique de 2 β-Lactamases (L-1 et L-2) induites et chromosomiques. Afin d'isoler le(s) gène(s) impliqué(s) dans ce mécanisme de résistance et d'étudier la régulation génétique, nous avons construit une banque génomique de P. maltohphilia dans le vecteur phagique λZ001. L'avantage de ce vecteur, c'est la présence de plusieurs sites de clonage. La croissance des phages sur une souche de E. coli P2 lysogène permet la sélection des recombinants (phénotype Spi-). Les fragments d'ADN chromosomique de 15 à 25 kb, obtenus par une …
