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Colloque
Les gènes de résistance aux β-lactamines font partie de transposons complexes et des études phylogénétiques suggèrent qu'ils sont souvent apparentés au transposon Tn21. Nous avons démontré que Tn21 possède une fonction tnpI, intégrase, permettant l'acquisition de gènes de résistance aux antibiotiques. Par clonage directionnel dans le plasmide pACYC184, nous avons isolé un fragment d'ADN BamHI-HindIII de 2.8 Kb comprenant tnpI et aadA de Tn21. La cartographie, la délétion de fragments d'ADN et la génèse in vivo de ce fragment en utilisant pOX38Km+ et les plasmides construits ont permis de localiser tnpI dans 2 fragments BamHI-AvaI-AvaI de 1.3 Kb. La détermination …
Colloque
Chez les bactéries à gram-négatif, l'électrofocalisation comparative permet de distinguer plus de 26 β-lactamases différentes codées par des plasmides. Comme alternative à cette méthode, nous avons construit des sondes d'ADN synthétiques. Le clonage moléculaire et l'édition de fragments d'ADN nous ont permis de localiser les gènes β-lactamases CARB-4, PSE-4 et SHV-1. Des fragments d'ADN interne aux gènes structuraux ont été séquencés selon la méthode de didéoxy. À partir de nos résultats et des séquences d'ADN connues TEM-1 et OXA-2, nous y avons synthétisé une série de sondes oligonucléotidiques par la chimie des phosphotriesters. La spécificité de chaque sonde a été …
Colloque
Nous postulons que la genèse de novo de transposons multirésistants chez les bactéries Gram négatif implique l'existence d'une région spécifique permettant l'acquisition de gènes de résistance. Par clonage directionnel dans le plasmide pACY184, nous avons isolé un fragment cryptique d'ADN BamHI-NruI de 1,45 kb adjacent au gène ß-lactamase OXA-2. La carte physique détaillée du plasmide recombinant pMON23 a été construite en utilisant 10 enzymes de restriction. Une homologie structurale entre les fragments d'ADN adjacents à 16 gènes ß-lactamases différentes a été confirmée par hybridation moléculaire en utilisant les fragments d'ADN BamHI-AvaI (600 bp) et AvaI-EcoRI (650 bp) de pMON23 comme …
Colloque
Un élément génétique mobile de 16 Kb codant pour la résistance au mercure, au sulfonamide, à la gentamicine, à la tobramycine et aux β-Lactamines a été isolé du plasmide pUD12. La carte physique d'ADN de pPMX02::Tn1413 a été construite à l'aide de 10 endonucléases de restriction. Les gènes de résistance ont été localisés par le clonage moléculaire de fragments d'ADN dans les vecteurs plasmidiques pUC19, pMP02 et pAC184. L'hybridation moléculaire avec des sondes transposases-résolvases de transposons connus indique que Tn1413 appartient à une nouvelle famille de transposons. Des similitudes et des différences structurales ont été confirmées en comparant avec les …
