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La RMN du deutérium des systèmes orientés procure des fenêtres d'observation dans l'étendue de fréquences (1-10^8 s^-1) où la plupart des mouvements moléculaires se produisent dans les bicouches lipidiques. L'étude des temps de relaxation longitudinale permet d'identifier les mouvements avec des vitesses à l'échelle de temps de la fréquence de Larmor. D'autre part, l'analyse des formes de raie et des temps de relaxation transverses permet d'étudier des mouvements se produisant sur une échelle de temps de l'ordre de 10^4 à 10^5 s^-1 tandis que l'analyse des spectres RMN à deux dimensions permet d'étudier des mouvements très lents, avec des vitesses …
Les hydrates de carbone sont impliqués dans une multitude d'interactions avec d'autres cellules, anticorps, hormones et drogues. La nature de ces interactions est toutefois inconnue. La RMN du deutérium d'hydrates de carbone marqués permet d'obtenir des informations sur leur organisation et leur dynamique. Nous avons préparé une série de glycosides deutérés. Les paramètres d'ordre moléculaire, la position de l'axe directeur du mouvement et l'orientation de cet axe par rapport à la normale de la bicouche ont été déterminés. Les paramètres d'ordre varient de façon considérable d'un hydrate de carbone à un autre et sont très sensibles à la nature du …
Nous avons étudié par RMN du deutérium les interactions entre un anesthésique local, la tétracaïne, et des bicouches de dimyristoyl-phosphatidylcholine (DMPC) et cholestérol. Les coefficients de partition de l’anesthésique dans des bicouches de DMPC et de DMPC et cholestérol ont été mesurés à pH 5.5 où la tétracaïne est majoritairement chargée et à pH 9.5 où la tétracaïne est majoritairement non chargée. De plus, la position de l’anesthésique dans la bicouche ainsi que son effet sur les paramètres d’ordre du cholestérol et de la DMPC dans les différents systèmes étudiés ont été déterminés par la mesure des écarts des quadripolaires …
Les domaines d’application de la spectroscopie RMN se sont étendus au cours des dernières années à l’étude in vivo des microorganismes. Dans ce cadre d’idées, nous avons développé un système de perfusion permettant de confiner une haute densité de cellules dans la région sensible d’un tube RMN. La technique implique l’insertion des cellules dans des capillaires de dialyse rénale de 200 µm de diamètre. La perfusion des capillaires permet par diffusion un apport en nutriments et en oxygène suffisant pour maintenir les cellules biochimiquement actives et prévenir l’accumulation de déchets métaboliques. La spectroscopie du phosphore-31 et du carbone-13 a été …
Nous avons mesuré le tenseur du déplacement chimique du 31P dans un monocristal d’acide 2-aminoéthylphosphonique. Les valeurs propres, par rapport à H3PO4 85%, sont : σ11 = 87.1, σ22 = 12.6 et σ33 = 47.5 ppm. Les deux composantes les plus blindées du tenseur sont situées à peu près dans le plan contenant les liaisons P=O, σ22 correspondant approximativement à la bissectrice de l’angle O–P=O et σ33 étant environ parallèle au vecteur O–C, qui lie la phosphore relativement déblindé dans la direction de σ11 perpendiculaire à ce plan. Une corrélation existe entre ces valeurs et la distribution de la densité …
Les glycolipides sont impliqués dans nombre de fonctions membranaires, parmi lesquelles le développement et la différenciation cellulaires, ou encore les transformations carcinogéniques. Les méthodes spectroscopiques conventionnelles ne nous informent guère sur la dynamique conformationnelle des segments carbohydrate à la surface des membranes car ceux-ci ont des résonances larges. La RMN du deutérium permet de déterminer l'orientation et les paramètres d'ordre des cycles pyranosiques pour peu que des atomes de deutérium y aient été introduits en des positions spécifiques. Le lipide étudié ici, i.e. le di-O-tétradécyl-1,2 O-(O-β-D-glucopyranosyl-β-D-glucopyranosyl)-3 D-glycérol, comporte deux cycles pyranosiques en principe flexibles l'un par rapport à l'autre. La …
La chromatographie liquide en phase inversée constitue une alternative attrayante à la chromatographie par échangeur d'ions pour l'analyse des acides aminés. Par le passé, le phénylisothiocyanate a été utilisé avec succès comme réactif, et la séparation des dérivés a été optimisée pour l'analyse des 18 acides aminés normalement présents dans les hydrolysats de protéines. Nous décrivons ici les conditions utilisées pour l'analyse de 25 acides aminés naturels. La séparation est effectuée sur une colonne Resolve Radial–Pak C–18 (particules de 5 μm). Pour le gradient, le premier solvant est un tampon acétate de sodium 25 mM à pH 5.45 contenant 1.25% …
Par RMN du carbone (13C), il a été possible d'observer que des érythrocytes parasités par Plasmodium avaient une activité glycolytique 25 fois plus élevée que celle d'érythrocytes normaux (x 10-12 u moles/min/cell). Cette technique a permis de comparer l'efficacité de certaines drogues antimalariennes d'après leur capacité à inhiber la glycolyse des érythrocytes parasités. Une réduction de la glycolyse était, dans l'ordre, "dimadmodiphénylsulfoxyde > quinine > primaquine > chloroquine". Au niveau du foie, nous avons employé la RMN du phosphore (31P) pour constater l'absence d'effet de l'infection malarique sur le niveau des nucléotides phosphorylés hépatique in vivo, et chez des foies …