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Colloque
Le développement de l'embryon est associé à des changements significatifs du nombre de sites liants les hormones thyroïdiennes. Pour vérifier si de tels changements sont principalement dus à des variations du niveau de synthèse de leurs mRNAs, nous avons comparé l'ontogenèse des mRNAs des récepteurs c-erbA avec l'ontogenèse des sites de liaison des hormones thyroïdiennes chez l'embryon de poulet. Saï et al. ont identifié que les protéines c-erbA sont des récepteurs de haute affinité pour les hormones thyroïdiennes (Nature, 323, 435, (1986)). En employant des sondes pour les types α1, α2 et β1 des récepteurs c-erbA nous avons dosé par …
Colloque
Les hormones thyroïdiennes exercent leur action en se liant à un récepteur nucléaire des cellules cibles. Nous avons étudié ces récepteurs dans les hépatocytes d'embryons de poulet. La mise en culture se fait avec la dissociation des morceaux de foie embryonnaire à l'aide de collagénase et d'hyaluronidase. Les cellules sont cultivées dans le milieu HAM's F-10 enrichi avec du sérum de veau (10%) et du bleu de trypane phosphate (107 TPB). Après trois jours de culture, nous incubons les cellules avec de la [125I]T3 et des doses croissantes d'hormones froides à 4°C pendant 48 heures. Les cellules sont ensuite lavées …
Colloque
Nous avons étudié les récepteurs de l'aldostérone provenant de reins d'embryons de poulet. Des extraits nucléaires (0.44 M KCl) et du cytosol sont préparés à partir de reins d'embryons âgés de 16 à 20 jours, dans une solution de 0.32 M sucrose, 3 mM KCl, 12 mM monothioglycerol (4°C 10%, glycérine dans le cytosol). Les préparations sont incubées à 4°C pendant 4 heures en présence de 6 nM [3H]aldostérone et de diverses concentrations d'aldostérone. Après séparation des complexes de l'hormone libre, les résultats sont analysés selon la méthode graphique de Scatchard pour la présence de 2 sites de liaison. Notre …
Colloque
Nous avons étudié la liaison de [3H]-Ethylketocyclazocine (EKC) au niveau du placenta humain en plus d'en définir son activité endocrine. Une incubation à 22ºC de [3H]-EKC avec des fractions membranaires enrichies de cellules syncytiotrophoblastiques en culture démontre une seule classe de récepteurs à haute affinité pour les membranes (Kd=10-9M) et de plus faible affinité (Kd=10-7M) au niveau cellulaire. Le nombre de sites varie entre 50 et 65 fmoles/mg protéines au niveau membranaire et s'avère de 4 pmoles/200 000 cellules au niveau cellulaire. Des études de liaison s'avèrent spécifiques et de type Kappa: ils ne sont pas affectés par DAGO (récepteur …
Colloque
Des études récentes ont démontré la présence de récepteurs liant spécifiquement l'aldostérone au niveau d'organes cibles tel que le rein. Comme tous les stéroïdes exercent ultimement leur action au niveau des noyaux, on a, au cours de cette étude, effectué des travaux de caractérisation du récepteur nucléaire de l'aldostérone dans le rein embryonnaire. Les noyaux de reins d'embryons de poulet de 17 jours obtenus après homogénéisation et centrifugation différentielle ont été exposés à du KCl 0.4M, afin d'extraire les récepteurs. Les dialysats de cet extrait ont été incubés à 4°C pendant 4 heures, en présence de [3H] aldostérone et de …
