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Colloque
À la recherche de tyrosine kinases pouvant agir comme oncogène dans la prostate, nous avons récemment isolé l'ADNc de FER. Cette enzyme n'a fait l'objet que de peu d'études et toutes ont été réalisées avec des lignées cancéreuses. Notre but est donc de déterminer son rôle possible en relation avec le cancer de la prostate. Pour comparer l'expression de FER dans des cellules normales et cancéreuses, nous avons produit des anticorps polyclonaux dirigés contre la portion C-terminale de cette protéine. Nos résultats de niveaux d'expression et de distribution cellulaire montrent que FER est principalement localisée dans la fraction cytosolique des …
Colloque
Les décès attribués au cancer de la prostate font suite à sa progression vers l'hormono-indépendance et le développement de métastases. Nos recherches portent sur les mécanismes facteurs de croissance (FC)-dépendants de contrôle de la prolifération des cellules épithéliales de la prostate et leur migration hors de la tumeur primaire. Comme les FCs activent des tyrosine kinases (TKs) intrinsèques ou associées à leur récepteur, nous avons caractérisé les TKs exprimées dans des cellules prostatiques FC-dépendantes et hormono-indépendantes en culture primaire. Nous avons identifié le récepteur de type 1 des FGF (p110 R-FGF), la "Focal Adhesion Kinase" (p125 Fak), deux membres de …
Colloque
La phosphorylation des protéines est cruciale pour la régulation des fonctions cellulaires. Pour identifier les protéine-kinases dans le cytosol de prostate humaine, nous avons d'abord procédé à l'électrophorèse des protéines en milieu dénaturant puis à leur renaturation suivie d'une incubation en présence d'ATP-[γ32P]. L'analyse autoradiographique nous a permis de détecter neuf sérine-thréonine kinases, et cela démontré par l'analyse des acides aminés phosphorylés. Pour détecter les tyrosine-kinases (TK), un polymère de glutamate et de tyrosine (poly GT), a été ajouté aux préparations avant l'électrophorèse. Suite à la renaturation et l'incubation avec l'ATP, les protéines ont été pontées (glutaraldéhyde) puis le gel …
Colloque
La présence de phosphatase acide prostatique (PAP) dans le sérum est associée au cancer de la prostate et les variations de ses niveaux peuvent témoigner de l'évolution de la maladie. Même si la PAP est une phosphotyrosyle protéine phosphatase (Pase), son rôle physiologique est encore mal connu. Nous croyons que la PAP intraglandulaire influence les taux de protéines phosphotyrosylées et conséquemment joue un rôle dans la croissance prostatique. Dans la présente étude, nous démontrons que la PAP du sérum est aussi très active dans ce contexte et augmente l'activité de certaines kinases et suggère un rôle local d'antagonistes tyrosine protéine …
Colloque
In vitro, des facteurs de croissance (FC) non-stéroïdiens régularisent la prolifération des cellules épithéliales de prostate canine. Afin de vérifier que le mécanisme d'action des FC est fonctionnel au niveau de ces cellules, une activité tyrosine protéine kinase a été détectée en identifiant les phosphoprotéines de 32P incorporées sur leurs résidus de tyrosine. Suite à l'incorporation de 32P, en présence de vanadate d'orthovanadate (V0 4), un inhibiteur des phosphatases protéiques, de nombreuses protéines phosphorylées ont été détectées (SDS-PAGE). Un traitement alcalin (KOH), réalisé pour hydrolyser les liens phosphosérine et phosphothréonine, permet de révéler uniquement des (Kobe: 29, 34, 38, 45, …
Colloque
La déphosphorylation des protéines, principalement sur les résidus de sérine, thréonyle et tyrosyle, est un prérequis à plusieurs fonctions cellulaires et la phosphorylation des résidus tyrosyles est plus spécifiquement reliée à la croissance cellulaire. La déphosphorylation de ces protéines peut aussi exercer un rôle régulateur et conséquemment nous avons étudié l'activité des phosphotyrosine phosphatases (PAP) sur les substrats p-nitrophenylphosphate (p-npp), phosphosérine (p-ser), phosphothréonine (p-thre) et phosphotyrosine (p-tyr). Différentes sources de PAP, telles les extraits de prostate canine et de tumeurs cellulaires épithéliales cultivées, le plasma séminal humain et de chien, une préparation de PAP partiellement purifiée sur gel (Mr 100-120 …
Colloque
Chez les mammifères, les spermatozoïdes acquièrent leur pouvoir fécondant lors de leur passage à travers l'épididyme. Certaines protéines sécrétées par ce tissu sont impliquées dans la maturation des spermatozoïdes. Dans le but de caractériser ces protéines, les tissus provenant de différentes régions de l'épididyme de hamster ont été incubés en présence de [35S]-méthionine. L'incorporation de [35S]-méthionine dans les protéines sécrétées par ces tissus a été mesurée au cours des 5 heures d'incubation. L'incorporation est maximale dans la région proximale et distale du corpus ainsi que dans la région proximale de la queue de l'épididyme, où le profil électrophorétique (SDS-PAGE) des …
Colloque
Le rôle des androgènes dans la pathogénie de l'hyperplasie bénigne et du cancer de la prostate demeure énigmatique. La plupart des études (récepteurs, enzymes, concentrations) sont effectuées à partir d'extraits subcellulaires, et ne tiennent pas compte de l'hétérogénéité cellulaire et fonctionnelle du tissu. Afin de préciser l'évolution de la liaison des androgènes en relation avec les fonctions des cellules épithéliales prostatiques, nous avons mesuré leur liaison à des cellules entières en culture de feuillets. Le méthyltriénolone (R1881), un précurseur de triamcinolone acetonide, a été utilisé comme ligand. La liaison à l'équilibre révèle la présence d'un site de liaison de haute …
