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Colloque
L'oxydation ou la réduction de la position 17 d'un androgène ou d'un estrogène a une influence majeure sur son activité biologique. Étant donné le rôle important de ces stéroïdes dans les cancers hormono-dépendants, nous avons purifié la 17β-hydroxystéroïde déshydrogénase de placenta humain. Les placentas humains provenant de grossesses normales furent homogénéisés dans du tampon 10 mM KH2PO4, 5 mM EDTA, 7 mM β-mercaptoéthanol, 20% glycérol pH 7.2. Le surnageant de centrifugation de 100 000 g, contenant l'activité soluble de l'enzyme est porté à 30% de saturation avec (NH4)2SO4. L'extrait est ensuite déposé sur une colonne de NAD-Sepharose (Pharmacia). L'activité enzymatique …
Colloque
Nous avons produit des anticorps monoclonaux contre la Prolactine humaine en fusionnant des cellules NSO avec des lymphocytes de souris immunisées pendant 5 mois avec hPRL. Les clones produisant les anticorps contre la prolactine ont été sélectionnés par une méthode radioimmunologique qui permet la détection rapide des clones possédant une haute affinité. Des 41 clones produits, nous avons sélectionné 15 anticorps dont nous avons déterminé la spécificité vis-à-vis de la PRL était très élevée. Tous ces anticorps possèdent un fort titre (1/10^7). Les constantes d'affinité varient de 2 x 10^8 à 8.6 x 10^9 litre/mole. Les anticorps iodés et immobilisés …
