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Anticorps monoclonaux humains dirigés contre Moraxella (Branhamella) catarrhalis
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Moraxella (Branhamella) catarrhalis se situe au troisième rang comme agent responsable d’otites moyennes aigües et chroniques chez l’enfant. De plus, il peut être un pathogène important chez l’adulte immunosupprimé. La prédominance de ce pathogène chez ces groupes s’explique sans doute par l’importance du statut immunitaire dans la résistance à l’infection. Dans cette étude, nous avons isolé les cellules lymphocytaires à partir de tissus amygdaliens afin d’évaluer leur implication dans la réponse immune contre M. catarrhalis. La présence de lymphocytes B sécréteurs d’immunoglobulines, principalement d’isotypes IgG et IgA, réagissant avec cette espèce bactérienne a été détectée par «enzyme-linked immunospot» (ELISPOT). De …

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Analyse des sites antigéniques de la porine d'Haemophilus influenzae type b (Hib)
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La protéine majeure de la membrane externe (40KDa) d'Hib exerce la fonction de porine. Sa purification a été effectuée par divers traitements de solubilisation au bromure de cétyltriméthyl ammonium et au CaCl2 suivie de précipitations éthanoliques. Le fractionnement par chromatographie sur DEAE-Sépharose nous permet d'obtenir la porine purifiée. La protéine de 40KDa représente 99% du contenu protéinique de la préparation purifiée, tel que démontré par l'analyse en SDS-PAGE. Des souris BALB/c ont été immunisées avec de la préparation de porine. Une proportion élevée d'anticorps induits sont dirigés contre des épitopes accessibles et/ou dénaturés lors d'une épreuve radioimmunologique avec des cellules …

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Étude des antigènes protéiques de la surface de Neisseria gonorrhoeae pour la production d'anticorps monoclonaux
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La production d'un anticorps monoclonal pouvant reconnaître un grand nombre de souches de Neisseria gonorrhoeae reste la clé d'un test diagnostique rapide. Les profils électrophorétiques de membranes des différentes souches, testées pour l'activité inhibitrice, ont été étudiés. La protéine P.1, qui se retrouve à la surface des cellules de N. gonorrhoeae, a été choisie comme cible à cause de la présence de son abondance chez tous les sérotypes. Des préparations de membranes extraites des sérotypes A1, B2 et W10, contenant une prédominance de la P.1, ont été utilisées pour l'immunisation de souris Balb/c. Une semaine après le dernier rappel, les …

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Production d'anticorps monoclonaux dirigés contre les protéines virales de l'entérovirus-70
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L'entérovirus-70 (EV-70) est un picornavirus qui cause une épidémie de conjonctivite hémorragique aiguë dans les régions tropicales densément peuplées. Ce virus est adapté à croître dans des cellules murines BAlb/c. À l'aide des techniques d'immunoblotting et d'immunoprécipitation, nous avons comparé l'expression des protéines virales de l'EV-70 dans les cellules murines et simiennes. Après diverses immunisations, la souris démontrant le plus haut titre d'anticorps par immunofluorescence indirecte sur cellules LLMC/M2 infectées, plusieurs bandes de neutralisation ont été choisies pour la fusion cellulaire. Les hybrides ont été triés par ELISA. Tous les clones positifs ont été réisolés par la technique de dilution …

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Caractérisation des anticorps monoclonaux dirigés contre Mycoplasma pneumoniae
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Mycoplasma pneumoniae est un agent généralement retrouvé dans les maladies respiratoires humaines. Les méthodes de diagnostic pour l'identification et la sérologie sont longues et fastidieuses. Dans le but d'améliorer le diagnostic, nous avons développé des anticorps monoclonaux contre la souche de Mycoplasma pneumoniae ATCC 15377. Plusieurs souris Balb/C ont été immunisées avec des cellules entières et de l'adjuvant complet de Freund. Les sérums hyperimmuns ont été vérifiés à l'aide de la technique d'immunoblotting. Trois fusions cellulaires ont été effectuées sur un intervalle de trois mois. Tous les surnageants étaient criblés en ELISA et par la technique d'immunoblotting. Dix hybridomes démontrant …

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