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La bactérie luminescente Photobacterium phosphoreum possède une réductase d'acides gras qui catalyse la synthèse d'aldéhydes à longues chaînes aliphatiques en présence d'ATP et de NADPH. Nous avons identifié deux activités associées à la réductase qui permettent de distinguer deux étapes successives de la réaction. L'enzyme catalyse: 1) la formation d'un intermédiaire insoluble dans l'eau lors de la réduction de l'acide myristique (3:6:1) au partir d'acide myristoyl-coA et ATP, ainsi que 2) la réduction du myristoyl-CoA à l'aldéhyde en présence de NADPH. La première étape de la production de l'intermédiaire est très rapide et atteint un plateau en moins d'une minute. …
Des études récentes ont démontré la présence d'une réductase d'acides gras dans les extraits de bactéries luminescentes, impliquée dans la synthèse d'aldéhydes à longues chaînes aliphatiques utilisés comme substrats par la luciférase. Nous avons partiellement purifié la réductase afin de diminuer le contenu en acides gras endogènes de la préparation et de séparer l'enzyme des réductases d'aldéhydes présentes dans les extraits. Le tétradécanal est alors le seul produit de conversion de l'acide tétradécanoïque observé après incubation de l'enzyme avec le NADPH et l'ATP, tel qu'analysé par chromatographie sur couche mince et par dosage couplé avec la luciférase. L'enzyme réduit aussi …
Deux Cbz-Phe-tRNA^Phe sélectivement marqués ont été utilisés pour étudier la dynamique des interactions tRNA-ribosome en présence de poly(U) et de facteurs. Un des marqueurs de spin est en position S4U et l'autre dans la région de l'anticodon en position U3ψ. Lors de la fixation sur le ribosome, le temps de corrélation du marqueur de spin en position S4U diminue tandis que celui du marqueur en position U3ψ augmente. La présence de poly(U) affecte peu l'allure des spectres RPE mais les changements sont plus marqués en présence de facteurs. Cependant, le nombre de corrélations d'un spin chargé ne varie pas. Ces …
Deux Cbz-Phe-tRNA^Phe sélectivement marqués ont été utilisés pour étudier la dynamique des interactions tRNA-ribosome en présence de poly(U) et de facteurs. Un des marqueurs de spin est en position S4U et l'autre dans la région de l'anticodon en position U3ψ. Lors de la fixation sur le ribosome, le temps de corrélation du marqueur de spin en position S4U diminue tandis que celui du marqueur en position U3ψ augmente. La présence de poly(U) affecte peu l'allure des spectres RPE mais les changements sont plus marqués en présence de facteurs. Cependant, le nombre de corrélations d'un spin chargé ne varie pas. Ces …
Deux Cbz-Phe-tRNA^Phe sélectivement marqués ont été utilisés pour étudier la dynamique des interactions tRNA-ribosome en présence de poly(U) et de facteurs. Un des marqueurs de spin est en position S4U et l'autre dans la région de l'anticodon en position U3ψ. Lors de la fixation sur le ribosome, le temps de corrélation du marqueur de spin en position S4U diminue tandis que celui du marqueur en position U3ψ augmente. La présence de poly(U) affecte peu l'allure des spectres RPE mais les changements sont plus marqués en présence de facteurs. Cependant, le nombre de corrélations d'un spin chargé ne varie pas. Ces …