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La poly (ADP-ribose) polymérase est une enzyme nucléaire catalysant, à partir de NAD+, la polymérisation successive des résidus d'ADP-ribose en polymères de poly (ADP-ribose) et leur liaison covalente à plusieurs protéines chromosomales dont les histones. Nous avons isolé des nucléosomes de complexités diverses grâce à des digestions limitées chromatine partagée par la nucléase micrococcale et nous avons observé que l'activité maximale de la poly (ADP-ribose) polymérase se localise dans les tri- et tétranucléosomes alors que l'enzyme semblait décroître en activité vers les dinucléotides et le nucléosome. Nous avons analysé la modification des histones et il fut observé que seule l'histone …
Les protéines nucléaires poly (ADP-ribosylées) et certaines protéines phosphorylées sont instables à pH basique et à haute température. À pH 6.8 et à la température de la pièce, une perte de 25% de polymère attaché à l'histone H1, qui est l'accepteur principal de la poly (ADP-ribosylation), est notée après 6 heures. À 1000°C et pH 6.8, une perte immédiate de 20% est notée. Les méthodes d'électrophorèse sur gel de polyacrylamide en présence de SDS sont utilisées à pH neutre ou basique. Nous avons développé une nouvelle méthode d'électrophorèse sur gel à pH 2.4 et à 40°C en remplaçant le dodécyl …
Les protéines HMG (High Mobility Group) sont des nucléoprotéines dans la classe des non-histones et caractérisées par une haute teneur en acides aminés acides (20-30%) et basiques (25-30%). La poly (ADP-ribosylation) des histones est bien connue chez les différentes espèces incluant les végétaux; par contre la poly (ADP-ribosylation) des HMG est peu connue. Nos travaux sur la poly (ADP-ribosylation) des protéines HMG montrent que seules trois types de HMG (1, 14 et 17) sur quatre types (1, 2, 14 et 17) connus sont modifiées dans les noyaux du pancréas de rat in vivo. La longueur du polymère attaché aux protéines …