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Dans le but d'élucider le mécanisme d'action de la LHRH au niveau de l'adénohypophyse, nous avons étudié l'implication possible du métabolisme des phosphoinositides dans des cellules gonadotropes en culture primaire. Ces dernières sont enrichies d'au moins 4 fois après centrifugation isopycnique dans un gradient linéaire de Ficoll de 3 à 7.5X (P/V). La LHRH (30 nM) stimule l'incorporation du 32phosphate (200 µci/ml) dans l'acide phosphatidique (PA) et le phosphatidylinositol (PI) selon une cinétique bien caractéristique. Les stimulations maximales d'incorporation du marqueur sont observées dans le PA et le PI à 2 et 25 min et atteignent alors 175 et 154% …
Il a été récemment démontré que la sécrétion d'ACTH et de β-endorphine est contrôlée de façon parallèle dans l'adénohypophyse de rat. Nous avons utilisé un extrait d'épinéphrine médiane rat comme agent stimulateur pour déterminer l'activité agoniste et antagoniste de glucocorticoïdes synthétiques sur la sécrétion d'ACTH et de β-endorphine mesurées par dosage radioimmunologique. L'acétanide de triamcinolone est le plus puissant des stéroïdes pour inhiber la sécrétion d'ACTH avec une inhibition demi-maximale (ED50) de 0.3nM alors que le cortisol et la dexaméthasone ont un ED50 de 50 et 3nM, respectivement. L'activité antagoniste d'une série de stéroïdes synthétiques a été ensuite étudiée en …
Après nos études sur les effets de l'inhibine non purifiée extraite de liquide folliculaire de porc dans les cellules adénohypophysaires de rat en culture primaire, nous avons entrepris l'isolement et la purification de cette substance. Suite à un traitement au charbon-dextran actif nous permettant d'éliminer plus de 99% des stéroïdes endogènes contenus dans le liquide folliculaire initial, nous avons procédé à une extraction des protéines par précipitation successive au sulfate d'ammonium. La fraction précipitant entre 25 et 40% de saturation par la suite été ultrafiltrée et le liquide retenu par la membrane (XM-50) a été déposé sur une colonne de …
L'ACTH (adrénocorticotropine) est une hormone dont le dosage radioimmunologique fut lent à établir tant à cause de la faible antigénicité de la molécule que de la difficulté d'obtenir un anticorps adéquat et stable. Nous avons obtenu des anticorps de haute affinité pour l'ACTH en couplant l'ACTH-(24-39) à l'albumine sérique de rat avec du carbodiimide. L'anticorps obtenu peut détecter des quantités d'ACTH inférieures à 100 pg/tube. L'ACTH humaine, de porc, corticotrope ainsi que l'ACTH synthétique 1-24 croisent à 100% avec cet anticorps, la spécificité de liaison à l'antisérum étant démontrée par la fraction 11-16 du peptide. Cet anticorps fut utilisé pour …
Les effets antifertilisants de la LHRH et de ses analogues sont maintenant bien reconnus et ces effets peuvent s'expliquer, du moins en partie, par une libération endogène de l'hormone lutéinisante (LH). Toutefois, des travaux récents ont montré la possibilité d'une action directe de la neurohormone au niveau des gonades. Ainsi, utilisant des cellules de la granulosa de porc en culture primaire, nous avons voulu évaluer une action possible de la LHRH sur les niveaux d'AMP cyclique induits par la FSH. L'incubation des cellules avec la LHRH naturelle ou un de ses analogues (D-Ser(tBU)6 des-Gly-NH210)LHRH ethylamide, en présence de 0.1 ng/ml …
Après exposition aux vapeurs d'o-phthalaldéhyde, les mastocytes (Mc) typiques du tissu conjonctif présentent une fluorescence jaune blanchâtre intense. Dans les mêmes conditions, les Mc sous-épithéliaux présentent une fluorescence allant du jaune plus ou moins au bleu pâle selon qu'ils sont plus ou moins rapprochés de l'épithélium adjacent. Une fluorescence bleu pâle est également observée dans les cellules granuleuses (CG) intraépithéliales dont la fluorescence est masquée par le magnésium. À la lumière de données microscopotumorétriques récentes, le passage du jaune intense au bleu indiquerait une dégranulation d'histamine. Les présents résultats appuient l'hypothèse que les CG proviennent de la migration intraépithéliale des …