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Colloque
Le site de fixation de la streptomycine sur la sous-unité 30S du ribosome bactérien est un site complexe où plusieurs protéines sont impliquées. Nous avons utilisé une nouvelle approche expérimentale pour caractériser ce site en liant covalemment la [2,3-3H]dihydrostreptomycine à la sous-unité 30S à l'aide d'un agent pontant, le phényldiglyoxal. À l'aide des techniques de filtration sur Millipore et de centrifugation au travers d'un gradient de saccharose, nous avons montré que, dans ces conditions adéquates, il est possible de lier covalentiellement la [2,3-3H]dihydrostreptomycine à la sous-unité 30S et que cette liaison est spécifique. Après ce pontage, les protéines ribosomiques sont …
Colloque
Le site de fixation de la streptomycine sur la sous-unité 30S du ribosome bactérien est un site complexe où plusieurs protéines sont impliquées. Nous avons utilisé une nouvelle approche expérimentale pour caractériser ce site en liant covalemment la [2,3-3H]dihydrostreptomycine à la sous-unité 30S à l'aide d'un agent pontant, le phényldiglyoxal. À l'aide des techniques de filtration sur Millipore et de centrifugation au travers d'un gradient de saccharose, nous avons montré que, dans ces conditions adéquates, il est possible de lier covalentiellement la [2,3-3H]dihydrostreptomycine à la sous-unité 30S et que cette liaison est spécifique. Après ce pontage, les protéines ribosomiques sont …
Colloque
Des mutants résistants à la néomycine (Nm) (100μg/ml) ont été sélectionnés à partir d'E.coli K12Y20, par traitement au méthanesulfonate d'éthyle. Les mutants obtenus sont des mutants doubles ou une mutation affecte le métabolisme énergétique tandis que l'autre affecte le ribosome. La mutation ribosomique est cotransductible avec le caractère aroE (elle est donc localisée dans la région str de chromosome). Elle peut aussi être séparée de la mutation affectant le métabolisme énergétique par conjugaison sur un milieu minimum. Cependant, séparée de l'autre mutation, elle se confère qu'une faible résistance à Nm (5-10 μg/ml). In vitro, dans un système de synthèse de …
Colloque
Nous avons comparé la stimulation d'erreurs de lecture in vitro par la streptomycine et la néomycine. Les systèmes de synthèse utilisés étaient dirigés par le polyuracile et individualisé l'acide aminé non-codé par le message (isoleucine, sérine, tyrosine, phénylalanine) et les incorporeurs. La fidélité de l'enchaînement d'acides non correspondants est altérée. La néomycine n'augmente pas le taux d'erreurs de lecture, contrairement à la streptomycine, ce qui entraîne l'obtention d'un produit de synthèse contenant 1 à 2 erreurs de lecture. Nous avons précédemment montré que la streptomycine et la néomycine perturbent la fidélité de lecture du message en augmentant les erreurs de …
