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Colloque
La protéine de membrane des virus de l'influenza est considérée comme étant spécifique de type. Mais récemment, des tests radioimmunologiques ont permis de différencier cette protéine chez deux souches de type A. Nous avons alors entrepris des études physico-chimiques afin de savoir si ceci était dû à une différence structurale. Les protéines ont été soumises à des digestions partielles et complètes à l'aide d'enzymes protéolytiques. Les peptides obtenus ont par la suite été analysés par électrophorèse, isoélectrofocalisation et chromatographie liquide à haute performance (HPLC). Jusqu'à maintenant, nous n'avons pu distinguer à l'aide de ces techniques les protéines de membrane de …
Colloque
Le virus de la rubéole, obtenu à partir de surnageants de cultures cellulaires Vero infectées, concentré par ultrafiltration et par centrifugation sur gradient de saccharose, a été injecté par la voie péritonéale à des souris Balb/C de façon à induire la formation d'anticorps spécifiques. Trois jours après la dernière injection, les souris furent sacrifiées et les rates prélevées pour en faire une suspension cellulaire. Les cellules de rate sensibilisées ont ensuite été fusionnées à des myélomatousses NS-1 à l'aide de polyéthylène glycol (PEG 1000). Les hybridomes obtenus ont été sélectionnés dans le milieu HAT et clonés par étalage à faible …
Colloque
L’identification des deux sérotypes du virus herpès simplex, est très difficile lorsque des antisérums polyvalents sont utilisés à cause de la dominance d’anticorps dirigés contre les antigènes communs. Par leur spécificité restreinte, les anticorps monoclonaux produits selon la technologie des hybridomes s’avèrent plus discriminatoires pour distinguer ces deux sérotypes. Cette étude a porté sur la possibilité de produire des anticorps monoclonaux pouvant distinguer les virus HSV-1 des virus HSV-2 et l’utilisation de ces anticorps dans les épreuves sérologiques conventionnelles. La fusion de cellules du myélome NS-1 avec des cellules spléniques de souris sensibilisées avec HSV-2, nous a permis d’obtenir 20 …
Colloque
La technique d'isoelectrofocalisation bidimensionnelle a été appliquée afin d'analyser certaines propriétés physico-chimiques des souches influenza A. Cette technique permet de déterminer le point isoélectrique (pI) et le poids moléculaire des protéines virales. Celles-ci obtenues après dissociation du virus A/PR/8/34 (H0N1) au NP-40 ou au SDS sont focalisées par électrophorèse en gradient de pH équilibre (IEF) et en gradient de pH non équilibré (NEPHGE). Dans le système IEF, les sous-unités de l'hémagglutinine et de la neuraminidase ont une hétérogénéité de charge marquée, laquelle pourrait être responsable, en partie, de leur microhétérogénéité. Le système NEPHGE, contrairement au système précédent, donne une focale …
Colloque
La protéine de membrane (M), sous-jacente à l'enveloppe du virus de l'influenza et de poids moléculaire de 25 000 d, est la plus abondante dans la particule virale. Son rôle biologique est très peu connu et contrairement aux protéines de surface qui subissent d'importantes variations antigéniques, elle s'avère relativement stable. Ses composantes peptidiques ont été analysées par l'action protéolytique contrôlée de la protéinase de S. aureus V8 dans le but éventuel de la comparer chez plusieurs souches de l'influenza. La digestion peut séparer les peptides résultants des peptides obtenus en fonction de leur poids moléculaire. Afin d'obtenir une résolution maximale …
Colloque
L'isolement de virus influenza A chez l'animal aussi bien que chez l'homme ainsi que la segmentation de sa nucléoprotéine supportent l'hypothèse de recombinaisons génétiques causant un problème épidémiologique majeur. Pour retracer l'origine parentale des souches pandémiques et caractériser les recombinants utilisés dans les vaccins atténués ou inactivés, nous avons combiné les techniques d'isoelectrofocalisation et d'électrophorèse. Dans un tel système, les protéines sont séparées dans la première dimension selon leur charge électrique et identifiées dans la seconde dimension selon leur poids moléculaire. Seules les protéines virales de pI 5,8 - 5,9, 6,03 - 6,1 - 6,17 ont été nettement focalisées. La …
