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Production d'anticorps monoclonaux contre l'hémagglutinine du virus de la rubéole
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Le virus de la rubéole, obtenu à partir de surnageants de cultures cellulaires Vero infectées, concentré par ultrafiltration et par centrifugation sur gradient de saccharose, a été injecté par la voie péritonéale à des souris Balb/C de façon à induire la formation d'anticorps spécifiques. Trois jours après la dernière injection, les souris furent sacrifiées et les rates prélevées pour en faire une suspension cellulaire. Les cellules de rate sensibilisées ont ensuite été fusionnées à des myélomatousses NS-1 à l'aide de polyéthylène glycol (PEG 1000). Les hybridomes obtenus ont été sélectionnés dans le milieu HAT et clonés par étalage à faible …

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Production d'anticorps monoclonaux contre l'hémagglutinine du virus de la rubéole
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Le virus de la rubéole, obtenu à partir de surnageants de cultures cellulaires Vero infectées, concentré par ultrafiltration et par centrifugation sur gradient de saccharose, a été injecté par la voie péritonéale à des souris Balb/C de façon à induire la formation d'anticorps spécifiques. Trois jours après la dernière injection, les souris furent sacrifiées et les rates prélevées pour en faire une suspension cellulaire. Les cellules de rate sensibilisées ont ensuite été fusionnées à des myélomatousses NS-1 à l'aide de polyéthylène glycol (PEG 1000). Les hybridomes obtenus ont été sélectionnés dans le milieu HAT et clonés par étalage à faible …

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Production d'anticorps monoclonaux contre l'hémagglutinine du virus de la rubéole
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Le virus de la rubéole, obtenu à partir de surnageants de cultures cellulaires Vero infectées, concentré par ultrafiltration et par centrifugation sur gradient de saccharose, a été injecté par la voie péritonéale à des souris Balb/C de façon à induire la formation d'anticorps spécifiques. Trois jours après la dernière injection, les souris furent sacrifiées et les rates prélevées pour en faire une suspension cellulaire. Les cellules de rate sensibilisées ont ensuite été fusionnées à des myélomatousses NS-1 à l'aide de polyéthylène glycol (PEG 1000). Les hybridomes obtenus ont été sélectionnés dans le milieu HAT et clonés par étalage à faible …

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Purification de l'hémagglutinine du virus de la rubéole par chromatographie d'affinité
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Le surnageant de cultures cellulaires Vero infectées par le virus de la rubéole, récolté puis concentré environ 200 fois par ultrafiltration, est traité au Tween 80 et à l'éther pour dissocier l'hémagglutinine de l'enveloppe. Nous introduisons ensuite l'antigène dans une colonne de Sepharose 6B couplé à des anticorps spécifiques de la rubéole, obtenus d'après la méthode décrite dans la littérature, égale à 1:512 par le test d'inhibition de l'hémagglutination. L'antigène se fixe aux anticorps en 2 heures à 20°C. Après la fixation nous éliminons par lavage tout ce qui n'est pas fixé. Les traitements avec NaCl 1 à 5M, thiocyanate …

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Purification de l'hémagglutinine du virus de la rubéole par chromatographie d'affinité
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Le surnageant de cultures cellulaires Vero infectées par le virus de la rubéole, récolté puis concentré environ 200 fois par ultrafiltration, est traité au Tween 80 et à l'éther pour dissocier l'hémagglutinine de l'enveloppe. Nous introduisons ensuite l'antigène dans une colonne de Sepharose 6B couplé à des anticorps spécifiques de la rubéole, obtenus d'après la méthode décrite dans la littérature, égale à 1:512 par le test d'inhibition de l'hémagglutination. L'antigène se fixe aux anticorps en 2 heures à 20°C. Après la fixation nous éliminons par lavage tout ce qui n'est pas fixé. Les traitements avec NaCl 1 à 5M, thiocyanate …

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