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Colloque
Des études antérieures ont démontré que l'utilisation d'un gradient discontinu d'albumine (BSA) permettait de séparer les cellules chromaffines en trois populations cellulaires (la couche I, II et III). Les études faites concernant les récepteurs opiacés démontrent tout d'abord que la préparation cellulaire originale possède des sites de liaisons opiacés à hautes affinités pour l'étorphine-3H avec une demi-saturation (Kd) de 0.6 nM. La saturation des sites apparaît à environ 2 nM et la liaison maximale est de 7.5 fmoles par 10^6 cellules. Cependant, les récepteurs sont surtout retrouvés au niveau de la couche cellulaire III (28.4 fmoles liées par 10^6 cellules). …
Colloque
Plusieurs analogues de la (Dyn-(1-13)) substitués par le remplacement de chacun de ses résidus un à un par une Ala, ont été synthétisés chimiquement et analysés par la mesure de leur activité biologique dans trois tests opiacés "in vitro". Avec la préparation de l'iléon de cobaye et de déplacement de liaison de l'étorphine aux membranes de cerveau de rat, l'intégrité des résidus en position 1,2,4,6,7 et 11 s'est avérée le plus indispensable pour la retention de l'activité biologique de la molécule. Par contre, de la ves défenses de souris, seuls les changements des résidus 1,2, 4 et 5 ont provoqué …
Colloque
Afin de comprendre plus à fond l'essence de l'immunorégulation dans la myasthénie grave (MG) nous avons étudié les récepteurs nicotiniques pour l'acétylcholine (RAch) sur les lymphocytes humains du sang périphérique. Des études de couplage utilisant 3H-bungarotoxine suggèrent la présence de tels RAch sur au moins certains de ces lymphocytes. Des études fonctionnelles révèlent la présence possible de deux récepteurs distincts. On observe un effet suppresseur biphasique de la nicotine sur la réponse proliférative des lymphocytes à la PHA, avec des pics à 10^-9 et 10^-5M. De façon opposée, on observe un effet stimulant biphasique avec des concentrations équimolaires de d-tubocurarine. …
Colloque
Différentes populations de cellules chromaffines sont isolées à partir de la médullo-surrénale de boeuf et leur contenu en dynorphine est comparé avec leur contenu en enképhalines et en catécholamines. Les cellules sont centrifugées à travers un gradient discontinu de BSA et 3 populations de cellules sont isolées (la couche I, II et III). La couche I contient surtout la noradrénaline, la couche II contient à la fois la noradrénaline et l'adrénaline dans des proportions égales et la couche III contient surtout l'adrénaline. La dynorphine est surtout contenue dans la couche I contrairement à l'enképhaline qui se retrouve en majorité dans …
Colloque
La dynorphine, ce peptide opiacé endogène le plus puissant connu à ce jour, tel que déterminé par son effet inhibiteur des contractions induites électriquement sur l'iléon de cobaye. La dynorphine a été initialement isolée à partir d'extraits d'hypophyse et peut être ensuite localisée dans plusieurs structures centrales telles que le noyau supraoptique et area neurohypophyse. Récemment nous avons identifié l'existence de la dynorphine dans la médullo-surrénale de bœuf, en développant un test d'immunofluorescence, spécifique à la dynorphine. Dans cette étude, la méthode d'immunofluorescence indirecte nous a permis de visualiser la localisation de la dynorphine dans les cellules de la médullo-surrénale …
Colloque
Un test radioimmunologique spécifique à la dynorphine a été mis au point. Pour ce, cinq lapins femelles (R31-R35) ont été immunisés avec un mélange de dynorphine et de BSA méthylée dans l'adjuvant de Freund complet. Dans ce mélange, la dynorphine se trouvait liée de façon stable de façon électrostatique mais lien covalent de façon à rendre la dynorphine immunogénique. Chacun des lapins injectés donna des anticorps avec différents degrés de sensibilité. Le meilleur anticorps obtenu (R31) était capable de lier 50% de la dynorphine tritiée (50 cI/mmoles), avec une courbe de dilution de l'ordre de 1:5000. À cette dilution d'anticorps, …
Colloque
L'interaction directe des fibres d'amiante avec l'interstitium pulmonaire peut jouer un rôle majeur dans les maladies associées à l'amiante. De manière à vérifier cette possibilité, nous avons étudié l'effet de l'amiante sur la prolifération des fibroblastes pulmonaires humains en culture. La substitution de la thymidine marquée par les fibroblastes. Cette stimulation est proportionnelle à la dose et est obtenue 48-72 h après incubation avec la chrysotile. Lorsque les fibres d'amiante sont enrobées de sérum pendant 24 h, la stimulation maximale est diminuée et survient à une concentration plus élevée de chrysotile (50 µg/ml). Cependant, en présence de fibres d'amiante, la …
Colloque
Les fibres standard (UIC) de chrysotile B causent une stimulation rapide des sécrétions de catécholamines à partir des cellules chromaffines isolées de la médullo-surrénale de bœuf sans changer leur viabilité (97%). La stimulation causée par les fibres d'amiante est sélective à chrysotile, les désorganisations étant observées à des concentrations de 7, 73, 160, 250 et > 500 µg par ml respectivement avec chrysotile B, la crocidolite A, la crocidolite, l'amosite et la silice. L'effet sécrétoire de la chrysotile B est additif à celui de l'acétylcholine et bloqué par le Co²⁺, le Ni²⁺, le Mg²⁺, l'ETCA et l'EDTA. Par contre, le …
Colloque
Les cellules de la médullo-surrénale de boeuf furent isolées par digestions successives avec la collagénase et par sédimentations différentielles sur gradients discontinus d'albumine de boeuf. Trois couches cellulaires ont été isolées: les couches I, II et III, chacune représentant 52, 37% et 30.5% du poids cellulaire initial, respectivement. Leur contenu en adrénaline et noradrénaline était de 21.0, et 24.3 nmoles par mg pour la couche I, 33.5 et 12.5 nmoles par mg pour la couche II, 20 et 4.7 nmoles par mg pour la couche III, respectivement. En présence d'acétylcholine, les sécrétions de catécholamines à partir des couches I, II …
Colloque
La stimulation muscarinique des niveaux de GMP cyclique à l'intérieur des cellules chromaffines isolées de la médullo-surrénale de bœuf dépend de la présence du calcium extracellulaire. Les niveaux de GMP cycliques peuvent être aussi stimulés par le potassium et l'ionophore A23187 en présence de calcium. D'autre part, la stimulation des sécrétions de catécholamines par la nicotine, la veratridine ou l'ionophore X537A n'est pas accompagnée par aucune augmentation des niveaux de GMP cyclique. Les effets des ions de calcium sur la sécrétion et l'augmentation de GMP cyclique seront aussi distingués par l'utilisation de bloqueurs ioniques tel le Co ou organiques tel …
