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La biotransformation du leucotriène A4 et son activité biologique
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Les leucotriènes (LTs) sont de nouveaux dérivés de l'acide arachidonique produits par une lipoxygénase. Le composé clé dans cette biosynthèse est le LTA4, qui peut se transformer soit en LTB4, soit en LTC4, D4 et E4. Nous avons étudié l'activité pharmacologique et le métabolisme du LTA4 par le poumon et l'iléon de cobaye. Nos résultats ont montré que le LTA4 est un puissant agent myotrope sur le parenchyme pulmonaire et qu'il est transformé rapidement en leucotriène C4, D4 et E4 (ces produits très actifs sont sur préparation), par des homogénats de poumon. D'autre part, le LTA4 n'est pas actif sur …

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Effet de métabolites de lipoxygénases sur la libération des hormones dans l'hypophyse antérieure
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Nous avons démontré récemment que l'acide 12-hydroxy-5,8,10,14-icosatétraénoïque (12-HETE), produit d'une lipoxygénase, constituait le métabolite majeur de l'acide arachidonique au niveau de l'hypophyse antérieure de rat. Nous avons donc étudié l'action de différents dérivés mono et dihydroxylés des lipoxygénases sur la libération des hormones par des cellules adénohypophysaires en culture primaire. Les différents métabolites étudiés à l'exception des leucotriènes B4, C4 et D4 (synthétiques) ont été préparés à partir d'acide arachidonique et de sources enzymatiques. Après une extraction des lipides, les divers métabolites ont été purifiés par chromatographie liquide (HPLC). Le produit obtenu a été confirmé par chromatographie en phase gazeuse …

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Métabolisme du leucotriène B4 (LTB4) dans les leucocytes
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Le LTB4, soit l'acide 5S,12R-dihydroxy-6,8,10,14-eicosatétraénoïque, est un métabolite de l'acide arachidonique dans les leucocytes. Le LTB4 contracte le parenchyme pulmonaire et s'avère un modulateur de plusieurs fonctions leucocytaires. Lorsque les leucocytes sont incubés en présence d'acide arachidonique et d'ionophore A23187, la concentration de LTB4 atteint un maximum entre 2 et 4 min pour ensuite décliner lentement, suggérant que le LTB4 est sujet à un catabolisme au niveau leucocytaire. Afin d'identifier les métabolites du LTB4, nous avons incubé des leucocytes humains (25 x 10^6/ml) avec le LTB4 (3 µg/il) à 37°C. Dans ces conditions le LTB4 est rapidement transformé en deux …

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Inhibition de la biosynthèse du leucotriène B4 par divers acides monohydroxyeicosatétraénoïques (HETEs)
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Le 12-HETE et le 15-HETE sont des produits naturels. Ils proviennent de l'action des C-12 et C-15 lipoxygénases (présentes respectivement dans les plaquettes et les leucocytes) sur l'acide arachidonique. Ajoutés à des suspensions de leucocytes humains périphériques, le 12-HETE et le 15-HETE subissent l'action de la C-15 lipoxygénase et sont transformés en dérivés dihydroxylés aux positions 5,12 et 5,15, respectivement. Parallèlement à ces transformations, on observe une inhibition de la biosynthèse de 5-HETE et de leucotriène B4, produits majeurs de la 12-lipoxygénase et de la 5-lipoxygénase dans les leucocytes. L'inhibition du semi-maximale est obtenue à des concentrations de 7,5 µM …

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Spécificité d'action de la leucotriène B4 sur le poumon
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Depuis la découverte des leucotriènes, plusieurs groupes se sont intéressés aux effets cellulaires de la leucotriène B4 (LTB4). Nous avons dirigé notre recherche vers les effets pulmonaires de cette substance. À l'aide de deux modèles expérimentaux, soit la trachée et le parenchyme pulmonaire de cobaye perfusés, nous avons démontré que la LTB4 est un agent myotrope 50-100 fois plus puissant que l'histamine, la dose seuil étant de 1 ng. L'action de la LTB4 sur le poumon est inhibée par l'atropine, un anti-histaminique, par des bloqueurs α et β, par un anti-α-adrénergique, par un anti-SRA et un anti-cholinergique, et un anti-SRS-A. …

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Isolement et analyse structurale d'un nouvel isomère de la leucotriène B4 (LTB4) dans les leucocytes
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Les leucocytes ont été préparés à partir de sang de porc; il s'agit d'une préparation contenant les polynucléaires et mononucléaires, contaminée par des plaquettes. Les leucocytes ont été incubés dans le salin phosphate de Dulbecco (100 x 10^6 cellules/ml à 37° durant 5 min) en présence de l'ionophore A23187 (10 μg/ml) et d'acide arachidonique (50 μg/ml). Après extraction à l'éther et fractionnement par colonne d'acide silicique, trois fractions contenant l'adsorbé et le monohydroxyacide de l'acide arachidonique ont été analysées par chromatographie liquide à haute pression sur colonne de silice et chromatographie en phase gazeuse. Nous avons identifié un nouveau métabolite …

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Médiation des effets pulmonaires de la leucotriène B4 (LTB4) par des métabolites de la cyclooxygénase
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La LTB4 peut induire la contraction des bandelettes de parenchyme pulmonaire de cobaye et déclencher la libération de PGS et de Tx par le poumon perfusé. Le présent travail a consisté à caractériser les mécanismes responsables de l'action pulmonaire de la LTB4. La mépacrine, un inhibiteur de la phospholipase A2, inhibe complètement l'action de la LTB4 sur le parenchyme pulmonaire, suggérant qu'une métabolite de l'acide arachidonique médie cette activité myotrope. Ces résultats ont été confirmés par l'utilisation de l'acide eicosatétraénoïque et du BW 755C, deux inhibiteurs à la fois de la cyclooxygénase et de la lipoxygénase, qui ont aussi supprimé …

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Étude sur le mécanisme de biosynthèse de la leucotriène B4-X (LTB4-X)
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La LTB4-X est un nouveau métabolite de l'acide arachidonique, soit l'acide-(5(S),12(S)-dihydroxy-6,8,10-14-eicosatétraénoïque, un isomère de la leucotriène B4. La LTB4-X est synthétisée par les leucocytes périphériques (de porc) contaminés par des plaquettes, alors que les granulocytes péritonéaux (de lapin) ou les leucocytes, ne produisent pas de cette substance. Ceci a soulevé l'hypothèse que les plaquettes jouent un rôle dans la biosynthèse de la LTB4-X. Nous avons donc incubé une suspension de leucocytes de porc avec le surnageant de la lipoxygénase des plaquettes, soit en présence ou en absence de peroxyde d'hydrogène. L'analyse des produits nous a permis de conclure que l'action …

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Transformation de l'acide arachidonique par les cellules de la granulosa de porc
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Il a été démontré à plusieurs reprises que les gonadotropines, de même que les prostaglandines E1 et E2 produisent une augmentation de la concentration de l'adénosine 3',5'-monophosphate dans les cellules de la granulosa. Plus récemment, il a été rapporté que les gonadotropines pouvaient également stimuler la production de prostaglandines par ces cellules, suggérant une corrélation entre la stimulation de l'AMPc et le rôle des prostaglandines dans la physiologie ovarienne. Afin de mieux comprendre le rôle des prostaglandines dans la physiologie ovarienne, nous avons étudié la transformation de l'acide arachidonique par les cellules de la granulosa de porc. Les cellules de …

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Rôle du Ca2+ dans l'action de la LH-RH et des prostaglandines (PGs) sur l'adényl cyclase adénohypophysaire du rat
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La présence du Ca2+ est essentielle à l'activation de l'adényl cyclase adénohypophysaire par la LH-RH (LH-releasing hormone). En effet, l'addition de 2 mM EGTA cause une inhibition complète de l'accumulation d'AMP cyclique induite par la LH-RH. La concentration de Ca2+ rétablissant 50% de l'effet maximal de la LH-RH sur l'adényl cyclase est d'environ 4 x 10-5M. L'effet de la LH-RH sur la libération de LH et FSH est parallèle à celui observé sur l'AMP cyclique. L'addition de PGE1 ou PGE2 produit une forte stimulation de l'accumulation d'AMP cyclique et de la libération de LH dans l'adénohypophyse intacte, contrairement à la …

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