Veuillez choisir le dossier dans lequel vous souhaitez ajouter ce contenu :
Filtrer les résultats
Colloque
La bactérie luminescente Photobacterium phosphoreum possède une réductase d'acides gras qui catalyse la synthèse d'aldéhydes à longues chaînes aliphatiques en présence d'ATP et de NADPH. Nous avons identifié deux activités associées à la réductase qui permettent de distinguer deux étapes successives de la réaction. L'enzyme catalyse: 1) la formation d'un intermédiaire insoluble dans l'eau lors de la réduction de l'acide myristique (3:6:1) au partir d'acide myristoyl-coA et ATP, ainsi que 2) la réduction du myristoyl-CoA à l'aldéhyde en présence de NADPH. La première étape de la production de l'intermédiaire est très rapide et atteint un plateau en moins d'une minute. …
Colloque
La bactérie luminescente Photobacterium phosphoreum possède une réductase d'acides gras qui catalyse la synthèse d'aldéhydes à longues chaînes aliphatiques en présence d'ATP et de NADPH. Nous avons identifié deux activités associées à la réductase qui permettent de distinguer deux étapes successives de la réaction. L'enzyme catalyse: 1) la formation d'un intermédiaire insoluble dans l'eau lors de la réduction de l'acide myristique (3:6:1) au partir d'acide myristoyl-coA et ATP, ainsi que 2) la réduction du myristoyl-CoA à l'aldéhyde en présence de NADPH. La première étape de la production de l'intermédiaire est très rapide et atteint un plateau en moins d'une minute. …
Colloque
La bactérie luminescente Photobacterium phosphoreum possède une réductase d'acides gras qui catalyse la synthèse d'aldéhydes à longues chaînes aliphatiques en présence d'ATP et de NADPH. Nous avons identifié deux activités associées à la réductase qui permettent de distinguer deux étapes successives de la réaction. L'enzyme catalyse: 1) la formation d'un intermédiaire insoluble dans l'eau lors de la réduction de l'acide myristique (3:6:1) au partir d'acide myristoyl-coA et ATP, ainsi que 2) la réduction du myristoyl-CoA à l'aldéhyde en présence de NADPH. La première étape de la production de l'intermédiaire est très rapide et atteint un plateau en moins d'une minute. …
Colloque
Des membranes de bordure en brosse d'entérocyte de lapin (m.b.b.) sont exposées à différentes concentrations de Triton X-100, d'EDTA et de diodosalicytate de lithium (LIS) en vue d'obtenir une solubilisation préférentielle de ces constituants. Après centrifugation, le centum protéique et glycoprotéique des lots sur gel de polyacrylamide de Triton X-100, à des concentrations supérieures à 0,05%, solubilise principalement les protéines enzymatiques associées à ces activités enzymatiques peuvent être dissociées. Les protéines associées peu ou pas dans l'ensemble de la solubilisation est peu spécifique. L'ensemble des résultats sont mis en association avec l'EDTA (1-10 mM) et LIS (0.2 M), les concentrations …
Colloque
Des membranes de bordure en brosse d'entérocyte de lapin (m.b.b.) sont exposées à différentes concentrations de Triton X-100, d'EDTA et de diodosalicytate de lithium (LIS) en vue d'obtenir une solubilisation préférentielle de ces constituants. Après centrifugation, le centum protéique et glycoprotéique des lots sur gel de polyacrylamide de Triton X-100, à des concentrations supérieures à 0,05%, solubilise principalement les protéines enzymatiques associées à ces activités enzymatiques peuvent être dissociées. Les protéines associées peu ou pas dans l'ensemble de la solubilisation est peu spécifique. L'ensemble des résultats sont mis en association avec l'EDTA (1-10 mM) et LIS (0.2 M), les concentrations …
Colloque
La méthode décrite par Schmitz et al. (Biochim. Biophys. Acta, 323 (1973) 98-112) pour la purification de la membrane de la bordure en brosse (m.b.b.) à partir d'intestin humain a été utilisée pour la purification de m.b.b. d'intestin et de cortex rénal, chez le lapin. Il est donc possible d'obtenir une membrane dénuée de ces débris de microvillosités. Les rendements protéiques des m.b.b. sont de 6.5% et de 5.0% pour l'intestin et le rein respectivement. L'analyse des activités sucrase, phosphatase alcaline, γ-glutamyltransférase, leucynaphthylamidase et tréhalase montre des coefficients de purification de 10 x en ordre de grandeur (enrichissement de 10 …
Colloque
La méthode de purification utilisée permet d'obtenir des membranes de bordure en brosse (m.b.b.) dans un état de pureté tel qu'il permet l'étude de leur composition protéique. Les m.b.b. ont été solubilisées par des détergents ioniques (sodium dodecyl sulfate: SDS, désoxycholate) et non-ioniques (Triton, Lubrol) à différentes concentrations (0.01-1%). Les résultats biochimiques et les profils électrophorétiques montrent que le SDS est l'agent de solubilisation le plus efficace; même à faible concentration (0.05%) il permet une bonne solubilisation des protéines membranaires. Après traitement des m.b.b. par 1% de SDS et électrophorèse, les profils électrophorétiques des m.b.b. provenant de duodénum, jéjunum et …
Colloque
Après solubilisation en présence de SDS à 1% et électrophorèse sur gel de polyacrylamide, la plupart des enzymes de la membrane de bordure en brosse d'entérocytes de lapin peuvent être séparées et localisées par leur activité. Dans ces conditions, la leucylaminopeptidase n'a qu'une faible activité et la γ-glutamyltransférase est complètement inactive. En abaissant la concentration de SDS à 0.05%, la solubilisation des protéines membranaires est satisfaisante et les peptidases conservent une activité nettement plus élevée. L'étude de l'effet des composants du système électrophorétique sur l'activité de ces enzymes a montré que le persulfate d'ammonium, initiateur de la polymérisation de l'acrylamide, …
