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Colloque
Les "microsphères denses" (MSD) ont été observées dans la matière grise de différentes parties du cerveau, et leur disparition progressive avec l'âge a été associée à l'apparition des plaques séniles. Les MSD sont isolées de cerveaux humains âgés normaux par des techniques de gradient isopycnique et nous avons déterminé leur densité propre. Nous présentons nos résultats de MSD obtenues, par groupe d'âge, et leur catégorisation par des tests d'identification des acides gras étudiés. La caractérisation des constituants des MSD a été déterminée par différents techniques immunohistologiques et histochimiques et nous présentons la batterie de résultats préliminaires obtenus. L'électrophorèse sur gel …
Colloque
Les "Microsphères Denses" ont été observées principalement dans la matière grise du cortex cérébral, de l'hippocampe, de l'hypothalamus et de l'amygdale cérébelleuse, et il a été rapporté que leur grosseur intrinsèque augmentait de façon constante avec le vieillissement. Nous avons isolé par des techniques d'ultracentrifugation différentielle et sur gradients de densité les microsphères denses présentes dans les cerveaux humains. Nous avons également retrouvé ces particules dans des préparations de cerveaux de verrats, de chevaux, de moutons, de chiens et de chats. Le cerveau, le foie, le rein, le pancréas et les surrénales d'humains ne contiennent pas de microsphères denses. Les …
Colloque
Les "Microsphères Denses" ont été observées principalement dans la matière grise du cortex cérébral, de l'hippocampe, de l'hypothalamus et de l'amygdale cérébelleuse, et il a été rapporté que leur grosseur intrinsèque augmentait de façon constante avec le vieillissement. Nous avons isolé par des techniques d'ultracentrifugation différentielle et sur gradients de densité les microsphères denses présentes dans les cerveaux humains. Nous avons également retrouvé ces particules dans des préparations de cerveaux de verrats, de chevaux, de moutons, de chiens et de chats. Le cerveau, le foie, le rein, le pancréas et les surrénales d'humains ne contiennent pas de microsphères denses. Les …
Colloque
La disparition des "Microsphères Denses" observée dans les cerveaux humains âgés a été reliée à l'apparition concomitante de "Microsphères Denses Dégénérées" et à l'apparition progressive de plaques séniles. Cette hypothèse semble corroborée par des travaux sur des spécimens atteints de la maladie d'Alzheimer. Nous avons procédé à des études de stabilité des microsphères denses âgées et reliée à l'apparition de plaques séniles et après sonication. Les effets gels et dégel successifs des échantillons, et de différents enzymes sur l'intégrité des microsphères denses, ont également été étudiés. Nous avons démontré que ces particules étaient résistantes à l'action de la DNAase, de …
Colloque
Nous présentons une méthode simple et générale pour l'analyse des profils métaboliques des stéroïdes urinaires par GC et GC/MS/COM. Dans un premier temps, les stéroïdes sont extraits par un support solide (XAD-2 ou Sep-Pak C18). La première étape de purification de l'extrait urinaire consiste à éliminer les substances basiques par filtration sur un gel lipophilique échangeur de cations (sulfo-propyl-Sephadex LH-20). Les stéroïdes sont par la suite fractionnés selon les trois groupes neutres (non conjugués), monoglucuronide, sulfate et disulfate sur un échangeur d'anion lipophilique de-hydroxybutyl, le tertahydroxypropyl Sephadex LH-20 (TEAP-LH-20). Les stéroïdes conjugués sont libérés par une brève hydrolyse enzymatique ou …
Colloque
Nous présentons une méthode simple et générale pour l'analyse des profils métaboliques des stéroïdes urinaires par GC et GC/MS/COM. Dans un premier temps, les stéroïdes sont extraits par un support solide (XAD-2 ou Sep-Pak C18). La première étape de purification de l'extrait urinaire consiste à éliminer les substances basiques par filtration sur un gel lipophilique échangeur de cations (sulfo-propyl-Sephadex LH-20). Les stéroïdes sont par la suite fractionnés selon les trois groupes neutres (non conjugués), monoglucuronide, sulfate et disulfate sur un échangeur d'anion lipophilique de-hydroxybutyl, le tertahydroxypropyl Sephadex LH-20 (TEAP-LH-20). Les stéroïdes conjugués sont libérés par une brève hydrolyse enzymatique ou …
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Nous présentons une méthode simple et générale pour l'analyse des profils métaboliques des stéroïdes urinaires par GC et GC/MS/COM. Dans un premier temps, les stéroïdes sont extraits par un support solide (XAD-2 ou Sep-Pak C18). La première étape de purification de l'extrait urinaire consiste à éliminer les substances basiques par filtration sur un gel lipophilique échangeur de cations (sulfo-propyl-Sephadex LH-20). Les stéroïdes sont par la suite fractionnés selon les trois groupes neutres (non conjugués), monoglucuronide, sulfate et disulfate sur un échangeur d'anion lipophilique de-hydroxybutyl, le tertahydroxypropyl Sephadex LH-20 (TEAP-LH-20). Les stéroïdes conjugués sont libérés par une brève hydrolyse enzymatique ou …
Colloque
La profilisation des stéroïdes endogènes par GC/MS est devenue ces dernières années un outil de diagnostic précieux pour caractériser les états pathologiques qui affectent leur métabolisme. Nous présentons une méthode générale d'isolement et de purification de ces substances axée sur a) l'extraction des stéroïdes libres et conjugués de matrices solides, b) l'hydrolyse enzymatique et la solvolyse rapide des stéroïdes conjugués, c) la purification des stéroïdes libres sur des gels lipophiliques, d) la formation de dérivés stables pour la protection des groupes acétylènes et hydroxyles et e) l'analyse en GC et GC/MS sur colonnes capillaires à haute puissance. Nous illustrerons quelques …
