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Des membranes du néocortex du rat furent incubées avec 3H-Prazosin (PRZ; 1.0 nM) pour marquer les sites α1 et avec 3H-p-aminoclonidine (PAC; 2.0 nM) pour identifier les sites α2. La fixation spécifique est déterminée par la fixation totale moins la fixation non-spécifique (en présence de 10 µM de phentolamine pour la PRZ ou de 10 µM de yohimbine pour la PAC). L'addition du détergent Triton X-100 (0.05%) après la marquage par les ligands diminue la fixation spécifique du PRZ (-75%) et de la PAC (-43%). Cependant, si le Triton est ajouté avant le marquage avec le ligand, la fixation spécifique …
Barbeau et Rossignol ont récemment montré que la clonidine (150 µg/kg) modifie grandement le "pattern" locomoteur des chats ayant subi une section de la moelle épinière au niveau T13. La clonidine est un agoniste adrénergique qui agit sur les adrénocepteurs de type α2, puisque l'on n'arrive pas à les essenciellement pré-synaptiques. Dans ce modèle cependant, seuls les sites post-synaptiques peuvent être marqués. La 3H-p-amino-clonidine peut servir à caractériser ces récepteurs dans la moelle épinière du chat. Cette étude compare les caractéristiques biochimiques de la fixation spécifique de la PAC dans la moelle épinière de chats normaux et de chats spinalisés …
Barbeau et Rossignol ont récemment montré que la clonidine (150 µg/kg) modifie grandement le "pattern" locomoteur des chats ayant subi une section de la moelle épinière au niveau T13. La clonidine est un agoniste adrénergique qui agit sur les adrénocepteurs de type α2, puisque l'on n'arrive pas à les essenciellement pré-synaptiques. Dans ce modèle cependant, seuls les sites post-synaptiques peuvent être marqués. La 3H-p-amino-clonidine peut servir à caractériser ces récepteurs dans la moelle épinière du chat. Cette étude compare les caractéristiques biochimiques de la fixation spécifique de la PAC dans la moelle épinière de chats normaux et de chats spinalisés …
Barbeau et Rossignol ont récemment montré que la clonidine (150 µg/kg) modifie grandement le "pattern" locomoteur des chats ayant subi une section de la moelle épinière au niveau T13. La clonidine est un agoniste adrénergique qui agit sur les adrénocepteurs de type α2, puisque l'on n'arrive pas à les essenciellement pré-synaptiques. Dans ce modèle cependant, seuls les sites post-synaptiques peuvent être marqués. La 3H-p-amino-clonidine peut servir à caractériser ces récepteurs dans la moelle épinière du chat. Cette étude compare les caractéristiques biochimiques de la fixation spécifique de la PAC dans la moelle épinière de chats normaux et de chats spinalisés …
Avec l'emploi des diverses techniques microchimiques, il s'avère indispensable d'exprimer les mesures réalisées sur de petites quantités de tissu en fonction de la concentration de la protéine de l'homogénat en question. Des déterminations de protéine furent faites dans les homogénats (20% poids/volume) issus de six régions cérébrales de rat. La méthode de réaction de Folin-phenol, avec les calculs du contenu en protéines, nous avons utilisé une analyse de régression linéaire en BASIC avec un microprocesseur 6502. Les concentrations des courbes standard étaient les valeurs des y et les densités optiques obtenues furent les valeurs des x (r = 0.975). Les …
Pour l'étude des propriétés du récepteur α1 noradrénergique cortical, nous avons déterminé les conditions optimales pour la fixation spécifique de l'antagoniste 3H-Prazosine (3H-PRZ; NEN ou Amersham, 18-28 Ci/mmol). À 25°C et dans un tampon Tris-Cl 50 mM à pH 7.4, les sites sont saturés (50% de fixation) en 7.4 min avec 0.5 nM de 3H-PRZ et cette fixation spécifique pouvait être déplacée avec 10 μM soit de PRZ, soit de phentolamine. La fixation est proportionnelle à la quantité de protéines présente (entre 0.124 et 1.121 mg/ml; r = 0.990). L'analyse de la courbe de saturation a démontré que la fixation …
Pour l'étude des propriétés du récepteur α1 noradrénergique cortical, nous avons déterminé les conditions optimales pour la fixation spécifique de l'antagoniste 3H-Prazosine (3H-PRZ; NEN ou Amersham, 18-28 Ci/mmol). À 25°C et dans un tampon Tris-Cl 50 mM à pH 7.4, les sites sont saturés (50% de fixation) en 7.4 min avec 0.5 nM de 3H-PRZ et cette fixation spécifique pouvait être déplacée avec 10 μM soit de PRZ, soit de phentolamine. La fixation est proportionnelle à la quantité de protéines présente (entre 0.124 et 1.121 mg/ml; r = 0.990). L'analyse de la courbe de saturation a démontré que la fixation …