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Colloque
L'acide désoxyribonucléique (ADN) obtenu par microextraction de cellules infectées par l'adénovirus canin (CAV) de type 1 ou 2 a été cillé par plusieurs endonucléases de restriction. Les produits de digestion ont été séparés par électrophorèse en gel d'agarose et certaines différences subtiles ont pu être observées dans les patrons de clivage de CAV-1 et CAV-2. L'identification rapide et précise de nombreux isolats cliniques obtenus de chiens souffrant d'infections respiratoires pourrait donc être accomplie par l'analyse des fragments de restriction.
Colloque
Plusieurs travaux ont souligné l'intervention possible des topoisomérases dans la réplication de l'ADN. Il est également connu que les fibroblastes humains cessent de répliquer leur ADN et de se multiplier après une cinquantaine de passages in vitro. En comparant la fidélité et l'efficacité des topoisomérases associées à la chromatine de cellules entre les passages 2 et 43, il nous a semblé possible de relier modification de conformation et réplication de l'ADN. Peu importe le niveau de dédoublement cellulaire, une topoisomérase de type I demeure toujours aussi efficace pour encocher et refermer une chaîne simple de nucléotides. Le relâchement de molécules …
Colloque
Les topoisomérases procaryotes ou eucaryotes, de types I et II, sont des enzymes qui modifient la conformation de l'ADN dans des conditions différentes. La topoisomérase de type I catalyse l'isomérisation de molécules d'ADN torsadées en molécules circulaires relâchées, alors que celle de type II effectue l'opération inverse en présence d'ATP. Nous avons découvert chez S. faecalis une topoisomérase de type I qui, contrairement aux enzymes bactériennes connues, fonctionne à haute force ionique (400 mM NaCl). Similaire en ce point aux topoisomérases eucaryotes, elle requiert toutefois des ions Mg++ (2-10 mM) pour fonctionner convenablement. Cette enzyme appartient donc à une catégorie …
Colloque
La transfection de cellules avec de l'ADN est une technique d'une importance capitale pour le clonage de gènes et l'étude de leur expression au niveau moléculaire. Cependant, l'aspect préservation des cellules a toujours été négligé dans ces expériences. En effet, la transfection est une infection permettant de conserver le maximum de cellules viables a donc été mise au point. Les cellules Véro (rien de singe) ont été utilisées comme indicateurs à cause de leur sensibilité relative au CaCl2. Nos résultats montrent que l'exposition du feuillet cellulaire à une solution de glycérol avant l'addition d'ADN SV40 précipité par le CaCl2 diminue …
Colloque
La transfection de cellules avec de l'ADN est une technique d'une importance capitale pour le clonage de gènes et l'étude de leur expression au niveau moléculaire. Cependant, l'aspect préservation des cellules a toujours été négligé dans ces expériences. En effet, la transfection est une infection permettant de conserver le maximum de cellules viables a donc été mise au point. Les cellules Véro (rien de singe) ont été utilisées comme indicateurs à cause de leur sensibilité relative au CaCl2. Nos résultats montrent que l'exposition du feuillet cellulaire à une solution de glycérol avant l'addition d'ADN SV40 précipité par le CaCl2 diminue …
Colloque
La transfection de cellules avec de l'ADN est une technique d'une importance capitale pour le clonage de gènes et l'étude de leur expression au niveau moléculaire. Cependant, l'aspect préservation des cellules a toujours été négligé dans ces expériences. En effet, la transfection est une infection permettant de conserver le maximum de cellules viables a donc été mise au point. Les cellules Véro (rien de singe) ont été utilisées comme indicateurs à cause de leur sensibilité relative au CaCl2. Nos résultats montrent que l'exposition du feuillet cellulaire à une solution de glycérol avant l'addition d'ADN SV40 précipité par le CaCl2 diminue …
Colloque
L'insertion d'un fragment d'ADN étranger dans le site Hind III du plasmide pAT153 inactive partiellement le gène tet, responsable de la résistance de Escherichia coli à la tétracycline. En présence de 80 μg/ml d'ampicilline et 4 μg/ml de tétracycline, les bactéries HB101 porteuses d'un plasmide recombinant forment sur agars complets, des colonies de taille inférieure à celles contenant le plasmide sauvage. Cette différence phénotypique importante nous a permis d'obtenir en quelques jours plusieurs centaines de plasmides dans lesquels des fragments Hind III de l'ADN du cytomégalovirus humain avaient été insérés. Dans les conditions actuelles, plus de 70% des petites colonies …
Colloque
Des particules d'aspect viral de type "R" ont été observées fréquemment dans des tissus tumoraux et dans des cellules transformées de hamsters. Récemment, des auteurs ont rapporté la présence de particules morphologiquement semblables dans les cultures d'autres espèces telles que l'homme, la souris, le rat, le lemur et le campagnol, et dans des tissus normaux de bœuf et de souris. Le but de notre étude est de rechercher ces particules par microscopie électronique au moyen de coupes ultra-minces dans des lignées cellulaires de différents animaux de laboratoire. Des résultats préliminaires ont montré la présence de particules de type R chez …
