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Le digalactosyldiacylglycérol (DGDG) est l'un des lipides majeurs de la membrane des thylacoïdes du chloroplaste. Le rôle de ce lipide non-ionique n'a pas été élucidé d'une manière claire. L'objet du présent travail consiste à étudier par spectroscopie infrarouge à transformée de Fourier : (i) les interactions moléculaires qui ont lieu lors de l'agrégation des membranes reconstituées avec DGDG sous l'effet des cations monovalents et divalents (NaCl, MgCl2, CaCl2), et (2) les interactions des protéines du photosystème II (PSII) avec les membranes reconstituées sous l'effet des mêmes cations. Nos résultats montrent que (i) le groupement ester de C-O ne semble pas …
La constante diélectrique (ε) de l'interface têtes polaires/chaînes hydrocarbonées des vésicules de phosphatidylcholine (PC) est déterminée à l'aide de la réaction entre le radical libre diphényl-picrylhydrazyl (DPPH) et l'α-tocophérol incorporés dans les vésicules. En variant la concentration de sel en phase aqueuse, on observe une variation de ε. Des échantillons ont été étudiés soit le NaCl et le KCl pour des concentrations allant de 0,1 à 0,5 μ. Des effets différents sur ε sont observés selon le sel étudié.
L'α-tocophérol par sa réaction avec le diphenyl-1,1 pycrlhydrazyle-2 (DPPH) a déjà été utilisé comme sonde à l'intérieur d'une bicouche lipidique afin de déterminer la polarité du site réactionnel (Bellemare, M.; Fragata, M. 1989, J. Colloid et Interface Science 77, 243). On croit que la position du noyau chromanol dans la bicouche de phosphatidylcholine (PC) d'une vésicule unilamellaire est liée au nombre d'unités isoprènes constituant sa chaîne hydrocarbonée. L'étude de la réaction entre le noyau chromanol, auquel est rattachée une chaîne hydrocarbonée comprenant 1, 2, 3, 4 unités isoprènes, dans les solvants et dans la bicouche lipidique des vésicules de PC …
Une des méthodes de préparation des vésicules unilamellaires consiste à soniquer une dispersion aqueuse de lipides. La suspension ainsi obtenue doit être purifiée afin d'obtenir un système homogène constitué de vésicules unilamellaires. La chromatographie sur gel de séphadex 4B et la centrifugation sont les méthodes les plus couramment employées pour purifier la suspension de lipides. Ces deux méthodes de purification ont été utilisées dans la préparation de vésicules mixtes constituées de phosphatidylcholine (PC) et de l'amphiphile à une seule chaîne carbonée, 1-α-tocophérol (α-T). Les paramètres suivants sont analysés: taux d'incorporation de l'α-T et sa répartition externe/interne dans la bicouche de …
Le taux d'incorporation de la chlorophylle a (Chl a) dans des vésicules unilamellaires de phosphatidylcholine (PC) a été étudié. Ces vésicules ont été préparées à partir de mélanges de chl a et PC dont les rapports molaires chl a/PC s'échelonnant de 0,1 à 7,0 Z. On a observé que le taux d'incorporation de la chlorophylle a augmente linéairement avec le rapport molaire initial (chl a/PC) jusqu'à environ 3 Z. Au delà de ce rapport, le taux d'incorporation varie très faiblement. À ce point particulier (28;75), une molécule de chlorophylle a par 75 phospholipides peut être incorporée dans la membrane. Le …
Nous avons procédé à la détermination de la polarité du site de la liaison hydrogène du radical libre 1,1-diphényl-2-picrylhydrazyl (DPPH) avec l'α-tocophérol avec les carbonyles de la phosphatidylcholine des vésicules unilamellaires. D'après cette méthode, on a étudié la variation des vitesses de la réaction du radical libre 1,1-diphényl-2-picrylhydrazyl (DPPH) avec l'α-tocophérol incorporé dans des couches bilipidiques des vésicules (1), et en solution dans le méthanol et dans les mélanges binaires d'éthanol et H2O (II). La conformation du noyau chromanol de l'α-tocophérol est à la fois le site de sa réaction avec le DPPH dans les systèmes I et II, et …
L'α-tocophérol est présent dans les membranes photosynthétiques des chloroplastes. Malgré les fonctions multiples attribuées à cette substance, ses interactions avec des pigments photosynthétiques ne sont que très incomplètement étudiées. En particulier, il serait important de distinguer entre le rôle de son cyclane et celui de sa chaîne carbonée. L'homogénéité du matériel constitue une étape préliminaire dans l'étude des interactions de l'α-tocophérol avec les autres éléments étudiés. Une méthode d'après HUNG (1969) modifiée et la chromatographie des vésicules contenant de la phosphatidylcholine et l'α-tocophérol. D'après ses réactions avec le 1,1-diphényl-2,2-dipicrylhydrazyl il semble qu'une série des molécules de l'α-tocophérol dans les lamelles …
Des vésicules liposomiques contenant de la chlorophylle a (Chl-a) et de la lécithine ont été préparées selon la méthode de colyophylisation développée par Thompson, Huang et Litman (1974). Ce procédé permet un meilleur mélange des phospholipides et des chlorophylles, et facilite ainsi l'insertion des pigments dans les membranes. Seules les vésicules constituées d'une couche bilipidique ont été utilisées dans cette étude. On a vérifié que le spectre d'absorption de la Chl-a présente une bande avec un maximum à 670 nm. Cette bande est attribuée à l'état monomérique de Chl-a (Oettmeier, Norris et Katz, 1976). En outre, les réactions de la …
L'effet de la température dans l'intensité de la fluorescence (I) des chloroplastes a été étudié à -20°, 20° et 30°C. L'étude de la variation de I a été faite dans un spectrofluorimètre Perkin-Elmer MPF-2A (photomultiplicateur R-136). Une solution de fluorescéine (5.10^-8M dans NaOH, λ) a été utilisée comme standard (I_0). L'activité photochimique du Système II a été mesurée en déterminant le taux de réduction du 2,6-dichlorophénolindophénol (E_0 = +0.217 V). On vérifie que: 1° la variation de I/I_0 en fonction du temps d'incubation des chloroplastes dans le milieu glycériné (50 p.c. cent) diminue faiblement à -20°C, tandis qu'à 20° et …
La colchicine est une molécule qui empêche le développement normal de la cellule. Cet empêchement peut être causé par la présence de liaisons hydrogènes entre les molécules de colchicine et le milieu biologique. Afin de vérifier cette hypothèse et pour préciser la nature des liaisons hydrogènes, une étude par spectroscopie infrarouge de la colchicine dans différents solvants organiques a été entreprise. Cette étude permettrait entre autres de déterminer quels groupes fonctionnels sont le plus susceptibles de participer à une telle liaison. La colchicine, la tropolone et la colchamnine ont été étudiées en utilisant des solvants de polarité différente et en …