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Communication
Les canaux calciques activés par le potentiel membranaire sont composés de 3 protéines distinctes : les sous-unités alpha-1, bêta, et alpha2-delta. La cinétique du flux calcique à travers alpha1 est modulée par les sous-unités auxiliaires alpha2-delta et plus significativement par les bêta. Il est maintenant accepté que les bêta se lient directement sur la boucle cytoplasmique qui relie les domaines I et II d'alpha-1 au niveau du site AID (DeWaard et al., 1997). L'ancrage primaire de bêta requiert la séquence consensus suivante : QQXXXXLXGYXXWI qui est conservée dans les canaux A, B, C, D, E et S. Dans certains cas, …
Communication
Les conséquences fonctionnelles du stress oxydatif ont été étudiées dans les myocytes ventriculaires cardiaques. La densité moyenne de courant calcique ("peak current density") dans les myocytes cardiaques isolés à partir de souris Swiss-Webster (35-37 jours) s'élève à 14 ± 2 pA/pF (n = 5) telle que mesurée en présence de la solution témoin (10 mM Ba). L'addition de 50 µM de 4,4'-dithiodipyridine (4,4'-DTDP) dans le milieu extracellulaire inhibe significativement les courants Ca2+ macroscopiques ("whole-cell") et la densité de courant chute à 3 ± 1 pA/pF (n = 5) après 5 minutes de perfusion. L'inhibition persiste après le retrait des oxydants …
Communication
Les canaux calciques s'activant en fonction du potentiel membranaire sont très sélectifs aux ions calciques dans les conditions physiologiques (PCa2+/PNa+>>500). La présence de quatre résidus négatifs glutamate (E) situé dans chacune des 4 régions "pores" (E393, E736, E1145, E1446) des canaux calciques de type-L a1C confère une grande sélectivité pour les cations divalents. La mutation d'un seul résidu glutamate dans le domaine III ou IV pour un résidu glutamine neutre (Q) diminue d'un facteur 10 la sélectivité Ca2+/Na+ (Parent et al., 1995). Les 4 résidus glutamates sont conservés dans la structure primaire de toutes les sous-unités alpha-1 des canaux calciques …
Communication
Les canaux calciques activés par le potentiel membranaire contrôlent l'entrée des ions calciques dans les cellules excitables. Les cinétiques d'activation et d'inactivation des canaux calciques déterminent donc directement la vitesse à laquelle les ions calciques pénètrent dans la cellule. But : Élucider les mécanismes moléculaires qui déterminent les cinétiques d'inactivation des canaux calciques. Méthodes : Le domaine I de a1C a été transposé dans a1E entre les sites ClaI et XhoI. Les ARNm ont été transcrits in vitro et exprimés dans les ovocytes de Xenope. Les cinétiques d'inactivation de la chimère CEEE ont été estimées par voltage imposé. Résultats : …
Colloque
Les canaux calciques activés par le potentiel membranaire (VDCC) contrôlent l’entrée du calcium dans les cellules excitables. En conséquence, les cinétiques d’activation et d’inactivation des VDCC déterminent directement la vitesse d’influx calcique dans ces cellules. Élucider les mécanismes moléculaires qui déterminent les cinétiques d'inactivation des canaux calciques. Nous avons construit des chimères entre les canaux alpha-1C (cinétiques lentes) et alpha-1E (cinétiques rapides) ainsi que des mutants ponctuels dans le domaine I de alpha-1E. Les ARNm codant pour la chimère CEEE, le mutant alpha-1E R378E et le triple mutant alpha-1E N381K + R384L + A385D (NRA-KLD) ont été exprimés dans des …
Colloque
Le rein joue un rôle vital dans l'homéostasie des substrats organiques et des minéraux. Parmi ces derniers, les ions calcium (Ca2+) sont réabsorbés en grande partie à travers la voie paracellulaire au niveau du tubule proximal. Toutefois, la régulation fine de l'entrée de Ca2+ se joue au niveau du tubule distal. La réabsorption de Ca2+ à ce niveau est sous le contrôle hormonal de l'hormone parathyroïde (PTH), la calcitonine et de la vitamine D. La nature des protéines membranaires responsables de la réabsorption calcique dans le tubule distal n'a pas encore été identifiée. Il est connu que l'influx calcique à …
Colloque
Dans les cellules cardiaques, l'influx de Ca2+ est essentiel au couplage excitation - contraction. De façon générale, la quantité totale de Ca2+ entrant dépend entre autres choses de propriétés intrinsèques du dit canal telles que la conductance et le "gating". Par exemple, l'inactivation du canal alpha-1E est rapide et purement dépendante du potentiel membranaire alors que l'inactivation du canal alpha-1C dépend à la fois du potentiel membranaire et de la présence de Ca2+. Nous avons donc utilisé les propriétés contrastantes de ces deux protéines pour étudier les mécanismes moléculaires qui contrôlent l'inactivation des canaux calciques à l'aide de chimères. La …
