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L´angiotensine II (AII) est un puissant déterminant de l´homéostasie cardiovasculaire. Plusieurs études ont démontré l´importance de AII dans l´hypertrophie cardiaque en utilisant les inhibiteurs de l´enzyme de conversion de l´angiotensine I ou des antagonistes du récepteur de AII de type 1 (AT1R). Étant donné que ces traitements diminuent également la pression artérielle et qu'une hypertension peut induire l'hypertrophie cardiaque, il est difficile de conclure que les effets hypertrophiques de AII sont médiés directement par les AT1R cardiaques. Pour tester cette hypothèse, des souris transgéniques (Tg) surexprimant l´AT1R humain dans les cardiomyocytes ont été générées. À 60 jours et plus, la …
Il n'existe pas de technique de mutagénèse dirigée applicable directement aux streptomycètes. Afin de réaliser ces expériences, il faut avoir cloné le gène d'abord chez E. coli avec un vecteur approprié puis après avoir effectué la mutagénèse, il faut recolier le fragment muté dans un vecteur de streptomycète pour évaluer les effets des mutations introduites. Pour éviter les travaux de sous-clonage, un vecteur navette a été construit. Ce vecteur pFZ12 (6.7 Kb) se compose du phagemid pFZ19 (2.8 Kb) qui se réplique chez E. coli, qui produit le phage filamenteux et qui peut porter une simple brin en utilisant le …
La souche P678-54 d'E. coli en phase de croissance exponentielle génère de façon continue des particules sphériques de 0,8 µm. Ces miniclules ne contiennent pas de DNA chromosomique par contre, chez les recombinants de cette souche, on retrouve du DNA plasmidique. Les miniclules servent en génie génétique à déterminer par transcription-traduction couplée la présence de gène(s) actifs dans des clones. Pour obtenir des miniclules libres de cellules-mères, nous avons mis au point une sédimentation sur un gradient de silice (PERCOLL). La comparaison, par microscopie optique et électronique ainsi que par électrophorèse sur gel de polyacrylamide des produits de la synthèse …