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Communication
Après liaison à son récepteur de surface (RI), les complexes insuline-récepteur sont rapidement internalisés dans l’appareil endosomal, lieu d’arrêt du signal et du recyclage du RI. Des études génétiques sur des patients diabétiques présentent la clairance de l’insuline comme facteur primaire du diabète de type 2. Les mécanismes contrôlant le trafic du RI sont peu connus. Les réalisations génomiques et protéomiques montrent que l’interconnexion des protéines en réseaux dynamiques est conservée et essentielle. Nous avons décrit un protéome de fractions golgi-endosomes (G/E) purifiées du foie de souris. Nos analyses bioinformatiques (MGI) confirment un fort enrichissement en protéines cargos, endosomales et …
Communication
L’activation de la phospholipase phosphatidylcholine spécifique (PLD) est associée à la réponse des récepteurs de surface à activité tyrosine kinase et aux mécanismes de transport intracellulaire. Afin d'étudier la compartimentation de PLD2 dans le foie de rat, nous avons généré un anticorps monospécifique en utilisant un peptide (GANTWPDLDLRDPVCDD) issu d’un motif de séquence non conservé avec la PLD1. L'utilisation d’un excès de peptides synthétisés confirme la spécificité de notre anticorps. PLD2 est présente dans les fractions hautement purifiées de membranes plasmiques et de Golgi/Endosomes (Li, Lh, Gi, Gh) isolées de foie de rats. L’injection intraveineuse d’une dose d’EGF (1mg/100g p.c) …
Communication
Nous avons identifié et isolé une protéine de 60 kDa de cellules de granulosa bovines que nous avons nommée VASAP-60 (Vacuolar System Associated Protein). Cette protéine se traduit par un ADNc de 2100 pb, dont un cadre de lecture ouvert de 1599 pb codant pour 533 acides aminés (60.1 kDa, pI 4.2). Cette protéine est identique à 87% à une protéine humaine, la 80K-H, et à 81 % à une protéine murine, la sous-unité-b de la glucosidase II. Ces deux protéines sont de fonctions indéterminées. Nous avons démontré que VASAP-60 est exprimée dans l'ensemble des tissus bovins analysés, mais que …
Colloque
L'insuline augmente le transport du glucose dans le muscle squelettique via le recrutement d'une protéine de transport (connue sous le nom de transporteur de glucose GLUT4) d'un pool membranaire interne à la surface cellulaire. Malgré des progrès récents dans ce domaine, le mécanisme par lequel l'insuline active la mobilisation de GLUT4 reste en grande partie inconnu. Suite à la liaison de l'insuline à son récepteur, l'activité tyrosine kinase de la sous-unité bêta est activée et le complexe ligand-récepteur est internalisé dans l'appareil endosomal. Il est généralement reconnu que dans les cellules hépatiques, le récepteur endosomal est rapidement déphosphorylé (t1/2 ~ …
Colloque
Le patron d’expression des protéines néosynthétisées et sécrétées par les cellules de granulosa est modifié suivant la relâche préovulatoire de la LH. Parmi les protéines majeures modifiées, une protéine de 58 kDa a été caractérisée. Cette protéine est issue d'un ADNc de 2100 pb, incluant un cadre de lecture ouvert de 1599 pb codant pour 533 acides aminés (60.1 kDa, pI 4.2). Cette protéine est associée aux structures membranaires; elle est exprimée dans la majorité des tissus, mais démontre un patron d'expression restreint à certains types cellulaires; et elle est présente chez la majorité des organismes supérieurs. La structure de …
Colloque
Le molybdate est un ion métallique connu comme inhibiteur de phosphatase et qui est reporté pour intervenir dans le blocage de l'inactivation des récepteurs nucléaires hormonaux. Nous avons étudié ici l'effet possible du molybdate sur le récepteur nucléaire de la L-T3. Après homogénéisation, les noyaux de foie de rat sont isolés par ultracentrifugation sur coussin de sucrose 2.4 M, lavés au Triton X 100 0.5% et le récepteur est extrait à pH 8 avec NaCl 0.4 M. À chaque étape est ajouté 0.1 mM de molybdate de sodium. Une diminution de la capacité maximum de liaison et de l'affinité est …
Colloque
Les hormones thyroïdiennes jouent un rôle essentiel sur le développement et la maturation du système nerveux central. De façon à étudier le mécanisme d'action au niveau cellulaire, nous avons étudié le récepteur nucléaire de la L-T3 dans les astrocytes en culture en mesurant sa liaison par la méthode de Scatchard. Les résultats montrent que la capacité maximale de liaison et l'affinité sont basses au 7e jour de culture (C = 0.0214 ng T3 X mg-1 DNA, Ka = 0.352 X 1010L-1), pour ensuite augmenter progressivement à 14 jours (C = 0.156 ± 0.05 ng T3 X mg-1 DNA, Ka = …
Colloque
L'action des hormones thyroïdiennes est initiée par la liaison de la triiodothyronine à un récepteur nucléaire associé à la chromatine acide. Dans le but d'éclaircir ce mécanisme, nous avons isolé ce récepteur à partir de noyaux de foie de rat en utilisant le 125I Bromoacetyl T3 comme marqueur d'affinité. Les protéines non histones sont extraites des noyaux avec tampon Tris pH 8 0.4 M NaCl, dialysées et soumises à l'électrophorèse en gel d'acrylamide SDS. L'autoradiographie révèle une bande majeure (PM: 57000) et une bande mineure (PM: 47000) qui sont chassées à 40Z en présence d'un excès de T3 non marqué. …
Colloque
L'action des hormones thyroïdiennes est initiée par la liaison de la triiodothyronine à un récepteur nucléaire associé à la chromatine acide. Dans le but d'éclaircir ce mécanisme, nous avons isolé ce récepteur à partir de noyaux de foie de rat en utilisant le 125I Bromoacetyl T3 comme marqueur d'affinité. Les protéines non histones sont extraites des noyaux avec tampon Tris pH 8 0.4 M NaCl, dialysées et soumises à l'électrophorèse en gel d'acrylamide SDS. L'autoradiographie révèle une bande majeure (PM: 57000) et une bande mineure (PM: 47000) qui sont chassées à 40Z en présence d'un excès de T3 non marqué. …
