Veuillez choisir le dossier dans lequel vous souhaitez ajouter ce contenu :
Filtrer les résultats
Colloque
On attribue une série de fonctions diverses à l'ARN de transfert. Entre autres, des changements qualitatifs et quantitatifs ont été observés au cours du développement de plusieurs organismes prokaryotes et eucaryotes. Nos travaux consistent à identifier des espèces isoaccepteurs d'ARNt cérébral, en particulier celles liées aux acides dicarboxyliques, ceci en établissant une cartographie électrophorétique bidimensionnelle sur gel de polyacrylamide (EGPA). Les ARNt de cerveau de rats de 8-10 et 10-12 jours furent préparés à partir d'un surnageant haute vitesse (SHV), absorbés sur colonne de DEAE-Sephacel, élués, déprotéinés, précipités à l'éthanol et lyophilisés. Cette préparation fut soumise à l'EGPA unidimensionnelle et …
Colloque
Un mélange d'acides aminés radioactifs est adsorbé sur un petit disque de papier lentille. De jeunes rats de 10 jours sont légèrement anesthésiés à l'éther et la boite crânienne ouverte pour exposer la surface du cortex. Les disques contenant les acides aminés sont déposés sur le cortex cérébral d'une hémisphère. La boite crânienne est refermée et la peau extérieure recousue. À différents intervalles (1-24 heures), les deux hémisphères ainsi que le cervelet sont prélevés. Les tissus sont découpés en tranches et l'incorporation du radioactif est déterminée dans la fraction acido-soluble et dans les protéines de chaque tranche. L'élimination de la …
Colloque
Un tRNA bactérien déficient en méthyle a été préparé à partir d'une culture de E. coli K12-58-161 Met-. Après une extraction au phénol, le tRNA a été purifié sur colonne de Sephadex G-200 et son activité biologique a été vérifiée par un essai d'amino-acylation. Le tRNA purifié a été utilisé pour effectuer des essais de méthylation hétérologue avec différents extraits enzymatiques de rat. Les patrons de méthylation ont été analysés par chromatographie sur colonne et par chromatographie sur couche mince. Les résultats obtenus montrent que pour ce qui est de la méthylation totale du tRNA, les différents extraits ont des …
Colloque
La chromatographie sur DEAE-cellulose est largement utilisée soit pour la préparation d'amino-acyl-tRNA synthétases soit pour récupérer le tRNA à partir de petits milieux réactionnels. L'isolement simultané des deux espèces macromoléculaires est compliqué étant donné les quantités plus élevées de synthétases par rapport au tRNA. Nous avons mis au point un procédé pour l'isolement et la purification du tRNA et des synthétases à partir d'un même extrait. Des extraits de levures contenant environ 15,000 µg, provenant de deux colonnes de DEAE-cellulose. La première colonne est nettoyée par un traitement avec du tRNA de levure en excès, en utilisant une faible concentration …
Colloque
La méthode colorimétrique de Lowry et al. est grandement utilisée pour le dosage des protéines dans des échantillons biologiques. Cependant, il fut observé que la concentration de protéine déterminée par cette méthode est affectée par une variété de substances habituellement présentes dans les extraits cellulaires, telles que le sucrose, les détergents, les sels, les composés sulfuryl, les acides aminés etc. La tentative de séparer ces substances des protéines par une précipitation acide entraîne souvent une perte des protéines, particulièrement lorsque la quantité de protéines dans l'échantillon est très petite. Dans cette communication, nous décrivons un procédé dans lequel l'échantillon protique …
Colloque
Plusieurs hypothèses ont été émises quant à la participation des tRNAs isoaccepteurs dans la régulation de la synthèse protéique au cours de la différentiation et du développement. Quoique l'examen des tRNAs isoaccepteurs des différents tissus de mammifères ait été fait en détail, il existe peu d'information sur la présence de plusieurs espèces de tRNAs dans le système nerveux sauf pour quelques acides aminés. Rien n'est connu quant à l'acide glutamique et la glutamine, bien que l'on sache que ces acides aminés jouent un rôle central dans le métabolisme du cerveau. Au cours du travail qui sera présenté dans cette communication, …
Colloque
Plusieurs hypothèses ont été émises quant à la participation des tRNAs isoaccepteurs dans la régulation de la synthèse protéique au cours de la différentiation et du développement. Quoique l'examen des tRNAs isoaccepteurs des différents tissus de mammifères ait été fait en détail, il existe peu d'information sur la présence de plusieurs espèces de tRNAs dans le système nerveux sauf pour quelques acides aminés. Rien n'est connu quant à l'acide glutamique et la glutamine, bien que l'on sache que ces acides aminés jouent un rôle central dans le métabolisme du cerveau. Au cours du travail qui sera présenté dans cette communication, …
Colloque
On sait que les protéines et le RNA sont méthylés à des endroits spécifiques dans la molécule après la formation de leurs chaînes primaires. Il a été démontré que cette modification, impliquant la méthionine comme donneur du groupement méthyle, affecte la structure de ces macromolécules et par conséquent leur rôle fonctionnel. Nous avons déjà montré que le cortex cérébral et le cervelet diffèrent considérablement dans leur capacité à synthétiser et à méthyler les différentes classes de RNA. Des travaux récents indiquent que le taux d'incorporation de la méthionine dans les protéines est plus élevé dans le cervelet que dans le …
Colloque
Les travaux décrits au cours de cet exposé portent sur la caractérisation du RNA de levures, de cerveau et de foie de rat et de perruche, par hydrolyse des RNAs à l'aide de la RNase pancréatique, la RNase T1 ou les deux à la fois. Les oligoribonucléotides ainsi obtenus sont alors séparés sur DEAE-Séphadex, en utilisant la méthode de Tener modifiée. Les modifications rendent possible l'utilisation de très faibles quantités de RNA provenant de mitochondries (0.5 à 1.5 mg de RNA). La résolution, après les modifications, est aussi bonne que celle obtenue par la méthode originale de Tener qui utilise …
Colloque
A l'aide d'un système in vitro, nous avons étudié la cinétique d'incorporation de groupements H-méthyles et C-uridine dans l'ARN cytoplasmique extrait du cortex et du cervelet étaient séparés et coupés en tranches de 0.5 mm à l'aide d'un coupe-tranches McIlwain. Chaque incubation était effectuée dans 20 volumes de milieu Krebs-Ringer standard contenant 50 µc de méthyle-H-méthionine et 5 µc de C-uridine. A la fin de chaque période d'incubation, les tranches étaient mises à froid et elles étaient récupérées par une courte centrifugation. L'ARN était extrait par un traitement au LIAC (Lauryl Trimethyl Ammonium Chloride) suivi d'une précipitation au MgSO4. Cette …
