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Nous voulons déterminer le mécanisme de régulation des enzymes du métabolisme du glutamate dans le cerveau. Pour cette étude, nous avons utilisé des cellules gliales (C6) et neuronales (Neuro-2a) en monoculture. Nous avons déterminé une activité glutamine synthétase (GS) très faible lorsque les cellules gliales sont cultivées en présence de glutamine. Lorsque les cellules sont cultivées en absence de glutamine, l'activité GS reste très faible dans les cellules gliales C6 mais augmente dans les cellules Neuro-2a. Nos résultats diffèrent de ceux obtenus dans les cultures d'astrocytes primaires qui montrent que la GS est localisée exclusivement dans les cellules gliales. Ces …
On attribue une série de fonctions diverses à l'ARN de transfert. Entre autres, des changements qualitatifs et quantitatifs ont été observés au cours du développement de plusieurs organismes prokaryotes et eucaryotes. Nos travaux consistent à identifier des espèces isoaccepteurs d'ARNt cérébral, en particulier celles liées aux acides dicarboxyliques, ceci en établissant une cartographie électrophorétique bidimensionnelle sur gel de polyacrylamide (EGPA). Les ARNt de cerveau de rats de 8-10 et 10-12 jours furent préparés à partir d'un surnageant haute vitesse (SHV), absorbés sur colonne de DEAE-Sephacel, élués, déprotéinés, précipités à l'éthanol et lyophilisés. Cette préparation fut soumise à l'EGPA unidimensionnelle et …
On sait que les protéines et le RNA sont méthylés à des endroits spécifiques dans la molécule après la formation de leurs chaînes primaires. Il a été démontré que cette modification, impliquant la méthionine comme donneur du groupement méthyle, affecte la structure de ces macromolécules et par conséquent leur rôle fonctionnel. Nous avons déjà montré que le cortex cérébral et le cervelet diffèrent considérablement dans leur capacité à synthétiser et à méthyler les différentes classes de RNA. Des travaux récents indiquent que le taux d'incorporation de la méthionine dans les protéines est plus élevé dans le cervelet que dans le …
A l'aide d'un système in vitro, nous avons étudié la cinétique d'incorporation de groupements H-méthyles et C-uridine dans l'ARN cytoplasmique extrait du cortex et du cervelet étaient séparés et coupés en tranches de 0.5 mm à l'aide d'un coupe-tranches McIlwain. Chaque incubation était effectuée dans 20 volumes de milieu Krebs-Ringer standard contenant 50 µc de méthyle-H-méthionine et 5 µc de C-uridine. A la fin de chaque période d'incubation, les tranches étaient mises à froid et elles étaient récupérées par une courte centrifugation. L'ARN était extrait par un traitement au LIAC (Lauryl Trimethyl Ammonium Chloride) suivi d'une précipitation au MgSO4. Cette …
Les densités de l'ADN nucléaire et mitochondrial des muscles de vol de S. gregaria sont respectivement de 1.702 g/cm3 (42.2% G-C) et 1.690 g/cm3 (30% G-C). Un traitement préalable des mitochondries à la DNase (250º C x 20 minutes) est nécessaire pour éliminer complètement l'ADN nucléaire qui contamine les préparations de mitochondries. Cet ADN peut se renaturer après une dénaturation à la chaleur pour redonner un ADN de densité semblable (1.691 g/cm3) à l'ADN natif. L'ADN libéré de ces mitochondries par choc osmotique et examiné en microscope électronique est circulaire et a une longueur d'environ 5µ comme les autres ADN …
Le contenu en ADN mitochondrial par mg de protéines est étudié en fonction du développement morphologique des mitochondries des muscles thoraciques de S. gregaria au cours du 5ième instar et chez l'adulte. Le développement des mitochondries étudié en microscopie électronique est décrit. Durant la période étudiée, le poids des muscles thoraciques augmente de 13 X (0.042 gr à 0.653 gr). Les conditions optimales d'évaluation de l'ADN du muscle sont définies. Les cinétiques de traitement des mitochondries à la DNase pancréatique à différentes températures sont décrites. L'effet de diverses substances sur le traitement à la DNase est étudié. Les valeurs d'ADN …
Nous avons déterminé quelques propriétés de la phosphomonoestérase alcaline dans des homogénats de T. confusum. Nous avons mesuré l'action enzymatique à différentes conditions de pH, de temps, d'incubation, de température et à différentes concentrations de substrat et d'enzyme. Nous avons étudié les effets de quelques ions métalliques divalents (Mn++, Mg++, Zn++) après addition d'un agent chélateur, l'EDTA. L'activité enzymatique n'est inhibée ni par l'iodosobenzoate ni par le p-chloro-mercuribenzoate. C'est dans la fraction soluble que nous retrouvons la plus grande activité spécifique.
Nous avons déterminé quelques propriétés de la phosphomonoestérase alcaline dans des homogénats de T. confusum. Nous avons mesuré l'action enzymatique à différentes conditions de pH, de temps, d'incubation, de température et à différentes concentrations de substrat et d'enzyme. Nous avons étudié les effets de quelques ions métalliques divalents (Mn++, Mg++, Zn++) après addition d'un agent chélateur, l'EDTA. L'activité enzymatique n'est inhibée ni par l'iodosobenzoate ni par le p-chloro-mercuribenzoate. C'est dans la fraction soluble que nous retrouvons la plus grande activité spécifique.
Nous avons déterminé quelques propriétés de la phosphomonoestérase alcaline dans des homogénats de T. confusum. Nous avons mesuré l'action enzymatique à différentes conditions de pH, de temps, d'incubation, de température et à différentes concentrations de substrat et d'enzyme. Nous avons étudié les effets de quelques ions métalliques divalents (Mn++, Mg++, Zn++) après addition d'un agent chélateur, l'EDTA. L'activité enzymatique n'est inhibée ni par l'iodosobenzoate ni par le p-chloro-mercuribenzoate. C'est dans la fraction soluble que nous retrouvons la plus grande activité spécifique.
In the present investigation we have determined the activity of MAO during the growth and metamorphosis of T. Confusum. We have also studied certain biochemical characteristics of this enzyme in the total homogenate. Zero-order reaction occurs for 40 minutes, with 6.29 x 10^-9 M final concentration of 14C-tryptamine at an optimum pH of 7.5. Michaelis constant (Km) under the optimal conditions is 8.7 x 10^-3 M. Maximum enzyme activity is obtained at 37ºC and the activation energy (E) is 10, 440 cal/mole, within the limits of optimum temperature. At optimum concentrations, Ni, Zu, Co and Mn activate the enzyme considerably. …